精细化学品性能测试 课程 - -1752704580121.pptVIP

《精细化学品性能测试》课程

职业教育精细化工技术专业教学资源库（2019-51）HPLC色谱法梯度洗脱与等度洗脱对比主要内容☆第一部分Q：HPLC法中，如何选择使用等度洗脱还是梯度洗脱？A1：HPLC法中，如何选择使用等度洗脱还是梯度洗脱？用梯度洗脱还是等度洗脱，主要看杂质的情况。同一物质有梯度洗脱和等度洗脱两种条件时，梯度洗脱的认可度较高。杂质与杂质、主峰、溶剂峰的分离度一定要好（不好的话就要用梯度洗脱）。A1：HPLC法中，如何选择使用等度洗脱还是梯度洗脱？1、杂质和主成分极性相差很大，杂质一定要全部都能洗脱出来（有时等度情况下冲两三个小时杂质也冲出不来，就必须考虑用梯度）。A1：HPLC法中，如何选择使用等度洗脱还是梯度洗脱？2、杂质和主成分极性相差较大，杂质出峰太晚（等度冲两个小时出来个杂质，就可以通过梯度缩短检样时间）A1：HPLC法中，如何选择使用等度洗脱还是梯度洗脱？3、还有就是杂质极性比主峰的大，等度时要想主峰时间合适杂质全堆在前边，杂质分开主峰又出峰太晚，这种情况也得考虑梯度洗脱。在能达到较好的分离度的情况下能用等度就用等度，用梯度要麻烦一些。A1：HPLC法中，如何选择使用等度洗脱还是梯度洗脱？梯度洗脱要求：1、洗脱液体积应足够大，一般要几十倍于床体积，从而使分离的各峰不致于太拥挤。2、梯度的上限要足够高，使紧密吸附的物质能被洗脱下来。A1：HPLC法中，如何选择使用等度洗脱还是梯度洗脱？梯度洗脱要求：3、梯度不要上升太快，要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸，会引起区带扩散；而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。A1：HPLC法中，如何选择使用等度洗脱还是梯度洗脱？梯度洗脱可分为低压梯度(又称为外梯度)和高压梯度(又称为内梯度)。(1)、低压梯度装置。低压梯度是采用比例调节阀，在常压下预先按一定的程序将溶剂混合后，再用泵输入色谱柱系统，也称为泵前混合。A1：HPLC法中，如何选择使用等度洗脱还是梯度洗脱？(2)、高压梯度装置。由两台(或多台)高压输液泵、梯度程序控制器(或计算机及接口板控制)、混合器等部件所组成。两台(或多台)泵分别将两种(或多种)极性不同的溶剂输入混合器，经充分混合后进入色谱柱系统。ThankYou!******************