1.2微生物的培养技术及应用第2课时课件 高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

第2课时第2节微生物的培养技术及应用

说出培养物、纯培养物和纯培养的概念。简述酵母菌纯培养的过程。阐明平板划线法的流程及注意事项。

培养基的类型培养基的营养物质常用的消毒方法常用的灭菌方法微生物的基本培养技术培养基无菌技术煮沸消毒巴氏消毒化学药剂消毒紫外线消毒湿热灭菌干热灭菌灼烧灭菌基本成分：碳源、氮源、水、无机盐特殊需求：维生素（如乳酸杆菌）、碱基等按物理性质划分按化学成分划分按用途划分

请同学们自主阅读教材P11-13，完成以下问题：1.相关概念：什么是培养物、纯培养物、纯培养？（P11）2.什么是菌落？单菌落？（P12）3.获得单菌落的方法有哪些？（P12）4.酵母菌的纯培养的基本步骤？（注意倒平板和接种的具体操作）配制培养基灭菌接种和分离酵母菌培养酵母菌倒平板稀释涂布平板法、平板划线法制备培养基三、微生物的纯培养

培养物纯培养物纯培养在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成含特定种类微生物的群体。由单一个体繁殖所获得的微生物群体。获得纯培养物的过程就是纯培养。配制培养基分离培养灭菌接种纯培养的过程：

(1)菌落：(2)单菌落：探究·实践——酵母菌的纯培养一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。不同种菌落的、、、、等不同。作为的重要依据。大小形态光泽度透明度颜色菌种鉴定酵母菌菌落探究·实践1.实验原理

微生物群在固体培养基上分散或稀释单个微生物繁殖单菌落(3)获得单菌落的方法稀释涂布平板法平板划线法纯培养物

酵母菌培养液、马铃薯、葡萄糖(或蔗糖)、琼脂、蒸馏水、天平、小刀、纱布、烧杯、锥形瓶、棉塞、牛皮纸(或报纸)、皮筋、培养皿、接种环、酒精灯、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌箱和恒温培养箱等。(1)学会配制培养酵母菌的培养基并倒平板。(2)学会进行无菌操作。(3)尝试通过平板划线操作来获得纯化的酵母菌菌落。3.材料用具2.目的要求

4.实验方法步骤：（1）制备培养基：①配制培养基→②灭菌→③倒平板称取去皮的马铃薯200g切成小块加水1000mL，加热煮沸至马铃薯软烂用纱布过滤滤液中加入20g葡萄糖，15~20g琼脂用蒸馏水定容至1000mL得到滤液制备培养基培养接种和分离

将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞包上牛皮纸，并用皮筋勒紧压力100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15~30min取5~8套培养皿培养皿叠成一束用几层牛皮纸包紧放入干热灭菌箱内，160~170℃灭菌2h②灭菌

③倒平板待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。

倒平板的具体步骤：1.拔出锥形瓶的棉塞2.将瓶口迅速通过火焰3.用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基（10-20mL）倒入培养皿，立即盖上皿盖4.等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒转过来放置待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。不能完全打开，以免杂菌污染培养基。目的：可以防止冷凝水落入培养基，造成污染。目的是灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

2.培养基灭菌后，为什么需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板?＞50℃，烫手。将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落产生以确定是否被污染。4.怎么确定所倒平板未被杂菌污染？3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？①因为平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,平板倒置后,可防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染；＜50℃，若不及时操作，琼脂就会凝固5.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，那么这个平板还能用来培养微生物吗？不能，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。②有利于培养基表面水分的挥发。如果需要调节培养基的pH，应该在定容完成后，灭菌之前进行操作。1.培养基pH要适宜,调pH是在灭菌前还是灭菌后？问题探讨

（2）接种和分离——平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。接种环连续划线逐步稀释得到单个菌落

①将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红操作前灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物思考1.为什么在操作前要灼烧接种环？②在火焰旁冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞。（2）接种和分离——平板划线法

③将试管口通过火焰目的是经灼烧灭菌，防止试管口的微生物污染菌种④将已