第15章合成生物学.pptVIP

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2.最小基因组的构建Blattnerj小组删除大肠杆菌基因组的15%(高达82Kb),细菌仍保持了良好的生存状态。改造后菌株的电穿孔效率、基因表达都有改变。第62页,共93页,星期日,2025年,2月5日电穿孔第63页,共93页,星期日,2025年,2月5日Endy小组用12kb人工合成的DNA取代野生T7基因组中的11kb的非必须DNA构建新的生命体。第64页,共93页,星期日,2025年,2月5日最小基因组优点选择性的保留所需的代谢途径和功能;成为合成基因网络理想的容器;为插入模块提高最简单无干扰的环境。第65页,共93页,星期日,2025年,2月5日理想的细胞底盘应具备的条件长期培养中保持基因稳定能够在低营养培养基中生长以降低成本同时协调多基因的表达能够通过调整合成路径抑制与生产无关的合成路径第66页,共93页,星期日,2025年,2月5日将藻胆青素合成基因(ho1和pcyA)转入大肠杆菌,使之能将血红素转化为光敏感的藻胆青素PCB。lacZompCpromoterPCBBlackPCBPCB第30页,共93页,星期日,2025年,2月5日15.3.2生命体代谢途径的重新构建微生物载体生产外源蛋白,目前人类利用E.coli生产1000多种人类蛋白。第31页,共93页,星期日,2025年,2月5日代谢途径改造----调节核心组件优化途径不同的生物学途径提取出来优化整合到宿主细胞合成目标化学物质第32页,共93页,星期日,2025年,2月5日1.生物质能和乙醇发酵微生物E.Coli的乙醇代谢重组菌:具有五碳糖和六碳糖代谢酶系混合酸发酵乙醇耐受能力低绿色植物和海洋藻类合成的有机物(生物质)约2200亿吨,相当于人类当前每年全部能耗的10倍。第33页,共93页,星期日,2025年,2月5日可用于发酵生产乙醇的部分微生物及其主要底物第34页,共93页,星期日,2025年,2月5日酵母的乙醇代谢工程酿酒酵母是工业上生产乙醇的优良菌株,与细菌相比具有较高的乙醇耐受力,对纤维素水解液中的抑制物有较高的抗性。缺点酿酒酵母缺乏木糖转化为木酮糖所需的酶,因而不能利用木糖,但它能利用木酮糖。对其菌种改造涉及木糖跨膜运输、吸收利用、磷酸戊糖途径、糖酵解及胞内氧化还原状态的维持等多个方面。第35页,共93页,星期日,2025年,2月5日酵母的木糖代谢工程第36页,共93页,星期日,2025年,2月5日运动发酵单胞菌的乙醇代谢工程第37页,共93页,星期日,2025年,2月5日大肠杆菌的乙醇代谢工程EMP第38页,共93页,星期日,2025年,2月5日主要优势大肠杆菌能够利用非常广泛的碳源,其中包括六碳糖(葡萄糖,果糖)和五碳糖(木糖,阿拉伯糖)以及糖酸等物质,这一特性使得大肠杆菌能利用木质纤维素降解产生的各种糖类,同时又由于大肠杆菌遗传背景清楚,因此在原核微生物乙醇代谢工程以及木质纤维素的高效利用中具有重要的研究价值。大肠杆菌的乙醇代谢工程第39页,共93页,星期日,2025年,2月5日大肠杆菌乙醇代谢工程中存在的问题1.大肠杆菌乙醇耐受能力低2.乙醇脱氢酶和丙酮酸脱羧酶在大肠杆菌中的表达研究不够充分3.竞争性代谢支路使得一部分碳源不能有效的转化成乙醇第40页,共93页,星期日,2025年,2月5日第41页,共93页,星期日,2025年,2月5日梭菌第42页,共93页,星期日,2025年,2月5日第43页,共93页,星期日,2025年,2月5日第44页,共93页,星期日,2025年,2月5日诱导微生物生产原油、柴油、汽油或基于烃的化学品利用来自多种生物的基因及用来生产脂肪酸的生化途径,用合成生物学方法创造出一些代谢模块,插入微生物后,通过不同的组合,这些模块可以诱导微生物生产原油、柴油、汽油或基于烃的化学品。他们通过计算,设计制造出微生物以所希望的方式生产并分泌出长度及分子结构符合公司要求的烃分子。第45页,共93页,星期日,2025年,2月5日不需要能耗非常高的乙醇精馏技术,从而可使能耗降低65%;由于采用了合成生物学与系统生物学创造微生物这种尖端技术,而且这种石油烃是可再生的、清洁的、国内可生产的、成本可竞争的、与现有的汽车发动机及汽油供应系统是可兼容的.

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