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发酵工程技术员岗位面试问题及答案

请简述发酵过程中培养基灭菌的常用方法及其原理？

答案：发酵过程中培养基灭菌常用方法有湿热灭菌法和干热灭菌法。湿热灭菌法利用饱和蒸汽的高温破坏微生物的蛋白质、核酸等生物大分子结构，使其变性失活，由于蒸汽潜热大、穿透力强，灭菌效果好；干热灭菌法则是通过高温使微生物细胞内的蛋白质氧化、变性、碳化和电解质浓缩中毒而死亡，常用于耐高温且不适宜湿热灭菌的物品。

发酵罐的溶氧量对发酵过程有何影响？如何控制溶氧量？

答案：发酵罐溶氧量对发酵过程影响重大，溶氧量不足会限制需氧微生物的生长和代谢产物合成，导致发酵周期延长、产量降低；溶氧量过高可能引起细胞代谢异常，增加生产成本。控制溶氧量可通过调节搅拌转速，提高搅拌强度能增加液体湍流程度，促进气体分散；改变通气量，增加通气量可提高溶氧水平；还可优化发酵罐的结构设计，如合理设置通气装置和挡板，改善气液传质效率。

如何进行发酵菌种的选育和保藏？

答案：发酵菌种选育可采用自然选育、诱变育种、杂交育种和基因工程育种等方法。自然选育是从自然界或生产过程中分离筛选优良菌株；诱变育种利用物理或化学诱变剂处理菌种，使其发生基因突变，再筛选优良突变株；杂交育种通过不同菌株间的基因重组获得优良性状组合；基因工程育种则是通过基因编辑技术定向改造菌种。菌种保藏常用方法有斜面低温保藏法，将菌种接种在斜面培养基上，低温保存；液氮超低温保藏法，将菌种悬浮在保护剂中，快速冷冻后保存在液氮中；真空冷冻干燥保藏法，先将菌种冷冻，再在真空条件下升华脱水，密封保存，这些方法能降低菌种代谢活性，延长菌种寿命。

发酵过程中常见的染菌原因有哪些？如何检测和处理染菌？

答案：发酵过程中常见染菌原因包括设备渗漏，如发酵罐、管道、阀门等密封不严；空气系统带菌，空气过滤效果不佳；培养基灭菌不彻底；操作不当，如接种、取样时未严格无菌操作。染菌检测可通过显微镜观察，查看发酵液中有无杂菌；检测发酵液的pH、溶氧量、糖含量等参数变化；进行平板划线分离，观察是否有杂菌生长。处理染菌时，若染菌早期，可适当提高灭菌温度或延长灭菌时间；若染菌严重，应及时放掉发酵液，对设备和管道彻底清洗、灭菌，重新接种发酵。

简述发酵工程中pH的调节方法？

答案：发酵工程中调节pH的方法有添加酸或碱，当pH过高时，可添加盐酸、硫酸等酸性物质调节；当pH过低时，添加氢氧化钠、碳酸钠等碱性物质。还可通过补料调节，如补加碳源可降低pH，补加氮源可升高pH；使用缓冲剂，如磷酸氢二钾和磷酸二氢钾组成的缓冲体系，能在一定范围内维持pH稳定。

发酵工程技术员需要掌握哪些仪器设备的操作？

答案：发酵工程技术员需要掌握发酵罐的操作，包括发酵罐的启动、运行参数设置与监控、灭菌等；掌握离心机的操作，用于发酵液的固液分离；熟悉分光光度计的使用，检测发酵液中物质的浓度；掌握高压灭菌锅的操作，对培养基、器皿等进行灭菌；还需会操作pH计、溶氧仪等在线检测仪器，实时监测发酵过程参数。

如何优化发酵工艺以提高发酵产物的产量和质量？

答案：优化发酵工艺可从多个方面入手，首先是培养基优化，通过实验确定碳源、氮源、无机盐等成分的最佳配比；其次是发酵条件优化，包括温度、pH、溶氧量、搅拌转速等参数的调整，通过单因素实验和正交实验等方法确定最佳参数组合；还可优化菌种，通过选育优良菌种或对菌种进行基因改造；此外，改进发酵方式，如采用分批发酵、连续发酵或补料分批发酵等合适的发酵方式，能有效提高发酵产物的产量和质量。

发酵工程中如何进行物料衡算和能量衡算？

答案：物料衡算是根据质量守恒定律，对发酵过程中物料的输入、输出和积累进行计算。确定发酵过程中各物料的组成和流量，列出物料平衡方程，计算各物料的消耗量和生成量。能量衡算是根据能量守恒定律，对发酵过程中的能量输入、输出和转化进行计算。考虑发酵过程中的热量传递，包括生物反应热、搅拌热、蒸发热等，计算能量的消耗和利用情况，通过物料衡算和能量衡算可优化发酵工艺，提高生产效率。

请说明发酵工程中无菌操作的重要性及具体措施？

答案：无菌操作在发酵工程中至关重要，染菌会导致发酵失败，使发酵产物质量下降、产量降低，增加生产成本，甚至影响产品的安全性。具体无菌操作措施包括环境无菌，对发酵车间定期清洁、消毒，保持空气洁净；设备无菌，发酵罐、管道等设备使用前严格灭菌；操作无菌，接种、取样等操作在无菌环境下进行，操作人员穿戴无菌工作服、口罩、手套等；培养基和发酵原料无菌，采用合适的灭菌方法确保其无菌状态。

发酵过程中如何进行过程控制与监测？

答案：发酵过程的控制与监测通过在线检测和离线检测相结合的方式进行。在线检测利用pH计、溶氧仪、温度传感器等仪器实时监测发酵液的pH、溶氧量、温度等参数，及时调整发酵条件；离线检测定期取