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第三节肉蛋及其制品中胆固醇的测定
1)胆固醇:其提纯方法为称取约6g胆固醇,加入60mL无水乙醇,在沸水浴中加热到溶解,置于冰箱中冷却,待结晶后倾去上清液。
2)硫酸铁铵储备液:溶解4.463g硫酸铁铵[FeNH4(SO4)2·12H2O]于100mL85%(质量分数)磷酸中。
3)硫酸铁铵显色剂:取10mL硫酸铁铵储备液用浓硫酸稀释至100mL,将此液放置在硅胶干燥器内,备用。
4)胆固醇标准溶液:准确称取重结晶胆固醇100mg,溶于冰醋酸中,并稀释至100mL。2.试剂1.测定原理第29页,共46页,星期日,2025年,2月5日第三节肉蛋及其制品中胆固醇的测定5)胆固醇标准使用液:取胆固醇标准液10mL,用冰醋酸稀释到100mL。
6)500g/L氢氧化钾溶液。
7)石油醚:重蒸馏。
8)氯仿:重蒸馏。
9)甲醇:重蒸馏。
10)50g/L氯化钠溶液。
11)纯氮气(纯度为99.99%)。
1)721型分光光度计。
2)电热恒温水浴。3.试剂第30页,共46页,星期日,2025年,2月5日第三节肉蛋及其制品中胆固醇的测定3)电动振荡器。
4)具玻塞试管(10mL、25mL)。
5)绞肉机。
(1)样品的处理和提取市售的肉类除去皮、筋,将肥瘦肉分开,分别在绞肉机中绞碎,肥肉绞2~3次,瘦肉绞3~4次,按下列步骤进行样品提取。
(2)样品分析吸取2mL样品氯仿提取液,置于带塞的25mL比色管内,在65℃水浴中用氮气吹干(吹时用水泵在另一端抽气)直抽到无氯仿气味为止(一般需4~5min)。4.操作方法第31页,共46页,星期日,2025年,2月5日第三节肉蛋及其制品中胆固醇的测定(3)标准曲线的绘制吸取胆固醇标准使用液0.0mL、0.4mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL置于25mL带塞比色管中。
1)氯仿提取液必须吹干,否则易出现混浊。
2)皂化必须完全,否则会出现混浊,一般60~65℃皂化1.5h即可避免。
3)在皂化时加入氯化钠可防止产生乳状,并加强石油醚的分离。6.说明5.结果计算第32页,共46页,星期日,2025年,2月5日第四节肉蛋及其制品中淀粉的测定
1)氢氧化钾酒精溶液:50g氢氧化钾溶于100mL95%(体积分数)酒精中。
2)2mol/L氢氧化钾溶液。
1)表面皿。
2)100mL容量瓶。
3)古代坩埚。
4)恒温水浴锅。
5)高温炉。3.仪器2.试剂1.原理第33页,共46页,星期日,2025年,2月5日第四节肉蛋及其制品中淀粉的测定
1)该法适用于蛋白质、脂肪含量较高的肉蛋制品,如午餐肉、灌肠等食品中淀粉的测定。
2)测定肉蛋制品中淀粉的含量也可以采用容量法。6.说明5.结果计算4.操作方法第34页,共46页,星期日,2025年,2月5日第五节肉蛋及其制品中三甲胺氮的测定
1)200g/L三氯醋酸溶液。
2)甲苯:试剂级,用无水硫酸钠脱水,再用0.5mol/L硫酸振摇,除去干扰物质,最后再用无水硫酸钠脱水使其干燥。
3)苦味酸甲苯溶液
①储备液:将2g干燥的苦味酸(试剂级)溶于100mL无水甲苯中,即成为20g/L苦味酸甲苯溶液。
②应用液:将储备液稀释成为0.2g/L苦味酸甲苯溶液,即可应用。2.试剂1.原理三甲胺[(CH3)3N]是鱼肉类食品由于细菌的作用,在腐败过程中,将氧化三甲胺[(CH3)3N]还原而产生的,系挥发性含氮物质,将此项物质抽提于无水甲苯中,与苦辣酸作用,形成黄色的苦味酸三甲胺盐,然后与标准管同进比色,即可测得检样中三甲胺氮含量。第35页,共46页,星期日,2025年,2月5日第五节肉蛋及其制品中三甲胺氮的测定4)1∶1碳酸钾溶液。
5)10%(体积分数)甲醛溶液:先将甲醛(试剂级,体积分数为36%~38%)用碳酸镁振摇处理并过滤,然后稀释成为体积分数为10%的甲醛溶液。
6)无水硫酸钠。
7)三甲胺氮标准溶液:称取盐酸三甲基胺(试剂级)约0.5g,稀释至100mL,取其5mL再稀释至100mL,取最后稀释液5mL用微量或半微量凯氏蒸馏法准确测定三甲胺氮的质量,并计算出每毫升的含量;然后稀释使每毫升含有100μg第36页,共46页,星期日,2025年,2月5日第五节肉蛋及其制品中三甲胺氮的测定图9-4Maijel
Gerson反应瓶第37页,共46页,星期日,2025年,2月5日第五节肉蛋及其制品中三甲胺氮的测定
1)25mLMaijelGerson反应瓶(见图9-4)。
2)100mL或150mL玻塞三角瓶。
3)100mL量筒。
4)微量或半微量凯氏蒸馏器。
5)分光光度计。
(1)样品处理将取得的被检样20g(视样品新鲜程度
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