探索调控miRNA的活性小分子：发现之旅与作用机制解析.docxVIP

探索调控miRNA的活性小分子：发现之旅与作用机制解析

一、引言

1.1miRNA概述

miRNA，即微小核糖核酸（microRNA），是一类长度约为21-25个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA，在真核生物中广泛存在。其发现可追溯到1993年，维克托?安布罗斯（VictorAmbros）和加里?鲁夫昆（GaryRuvkun）在秀丽隐杆线虫中发现了第一个miRNA——lin-4，开启了miRNA研究的新纪元，两人也因发现miRNA及其在转录后基因调控中的作用，荣获2024年诺贝尔生理学或医学奖。

从结构特征来看，miRNA通常由具有发夹结构的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成。它的长度较短，一般在21-25个碱基左右，却蕴含着强大的生物学功能。在不同生物体中，miRNA普遍存在，具有一定的保守性，但其序列在动植物之间尚未发现完全一致的情况。而且，miRNA具有鲜明的表达阶段特异性和组织特异性，在生物体的不同发育阶段和不同组织中，其表达水平存在显著差异。在基因存在形式上，miRNA以单拷贝、多拷贝或基因簇等多种形式存在于基因组中，大部分位于基因间隔区。功能特点上，一个miRNA可调控多个靶基因，而多个miRNA也可调节同一靶基因，这种复杂的调控关系使得miRNA在基因表达调控网络中扮演着关键角色。

miRNA的生物合成是一个复杂且精细的过程，涉及多个步骤和多种酶的参与。在细胞核中，miRNA基因首先由RNA聚合酶II转录生成初级miRNA（pri-miRNA），pri-miRNA是一种长度较长的RNA转录本，通常包含多个茎环结构。随后，pri-miRNA在微处理器复合体（由Drosha酶和DGCR8蛋白组成）的作用下，被切割成约70-90个核苷酸的前体miRNA（pre-miRNA），pre-miRNA呈发夹状结构。接着，pre-miRNA在转运蛋白exportin-5的协助下，从细胞核转运至细胞质中。在细胞质中，pre-miRNA被另一种RNaseⅢ酶——Dicer酶进一步切割，去除发夹结构的环部，产生长度约为21-25个核苷酸的成熟miRNA双链。成熟miRNA双链中的一条链会与AGO蛋白结合，形成RNA诱导沉默复合体（RISC），而另一条链则通常被降解。

在基因表达调控中，miRNA起着不可或缺的关键作用。其主要通过与靶mRNA的互补配对，进而抑制转录后的基因表达。当miRNA与靶mRNA的3非翻译区（3UTR）特异性结合时，会导致靶mRNA的降解或抑制靶mRNA的翻译过程，从而实现对基因表达的调控。这种调控方式具有高度的特异性和灵活性，能够对生物体的各种生理过程进行精确调控。例如，在细胞增殖、分化、凋亡以及个体发育等过程中，miRNA都发挥着重要的调节作用。在细胞增殖过程中，某些miRNA可以通过调控相关基因的表达，促进或抑制细胞的增殖；在细胞分化过程中，miRNA能够引导细胞朝着特定的方向分化，决定细胞的命运；在个体发育过程中，miRNA参与了从胚胎发育到成体形成的各个阶段，对器官的形成和功能的建立起着关键作用。此外，miRNA的异常表达与多种疾病的发生发展密切相关，如癌症、心血管疾病、神经系统疾病等，这使得miRNA成为了疾病诊断、治疗和预后评估的重要靶点和生物标志物。

1.2研究背景与意义

miRNA在基因表达调控网络中占据着核心地位，对其活性的深入研究对于全面理解基因调控网络具有不可替代的重要意义。miRNA通过与靶mRNA的特异性结合，能够在转录后水平对基因表达进行精准调控，这一过程涉及到细胞的增殖、分化、凋亡以及个体发育等众多关键的生理过程。例如，在胚胎发育过程中，特定的miRNA表达模式能够引导细胞朝着不同的方向分化，形成各种组织和器官。如果miRNA的活性出现异常，就可能导致细胞分化异常，进而引发先天性疾病。在细胞增殖和凋亡过程中，miRNA也发挥着重要的调节作用。一些miRNA可以促进细胞增殖，而另一些则可以诱导细胞凋亡，它们之间的平衡对于维持细胞的正常生理功能至关重要。一旦miRNA的活性失调，就可能打破这种平衡，导致细胞过度增殖或凋亡，从而引发肿瘤等疾病。因此，深入研究miRNA的活性，有助于揭示基因调控网络的精细机制，为理解生命过程的本质提供关键线索。

从疾病治疗的角度来看，miRNA活性小分子的研究为攻克多种难治性疾病带来了新的希望。众多研究表明，miRNA的异常表达与癌症、心血管疾病、神经系统疾病等多种重大疾病的发生