第十章-吸光光度法S【共55张PPT】.pptVIP

1、光源（lightsource）用6~12V钨丝灯作可见光区的光源，发出的连续光谱在400~2500nm范围内。光源应该稳定，即要求电源电压保持稳定。为此，通常在仪器内同时配有电源稳压器。2、分光系统分光系统的作用是将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。分为棱镜和光栅。棱镜（prism）：根据光的折射原理而将复合光色散为不同波长的单色光，然后再让所需波长的光通过一个很窄的狭缝（slit）照射到吸收池上。由玻璃或石英制成。玻璃棱镜用于可见光范围，石英棱镜则在紫外和可见光范围均可使用。光栅（grating）是根据光的衍射和干涉原理将复合光色散为不同波长的单色光，然后再让所需波长的光通过狭缝照射到吸收池上。它的分辨率比棱镜大，可用的波长范围也较宽。3、吸收系统——比色皿或吸收池用于盛放试液的容器。它是由无色透明、耐腐蚀、化学性质相同、厚度相等的玻璃制成的，按其厚度分为0.5cm，lcm，2cm，3cm和5cm。在可见光区测量吸光度时使用玻璃吸收池，紫外区则使用石英吸收池。使用比色皿时应注意保持清洁、透明，避免磨损透光面。4、检测器detector接受从比色皿发出的透射光并转换成电信号进行测量。分为光电管和光电倍增管。光电池photocell光电管（phototube）：光电倍增管（photomultiplier）5、信号显示系统作用是把放大的信号以吸光度A或透射比T的光度分析法的设计方式显示或记录下来。分光光度计常用的显示装置是检流计、微安表、数字显示记录仪。三、吸光度的测量原理借助分光光度计来测量一系列标准溶液的吸光度，绘制标准曲线，根据被测试液的吸光度，从标准曲线上求得被测物质的浓度或含量。步骤：调0→调100（参比溶液）→测A（待测溶液）四、分光光度计的类型1、按波长范围分：紫外-可见；可见；红外2、按仪器的结构：单光束；双光束；双波长§10.3吸光光度法分析条件的选择1、显色反应（colorreaction）待测物质本身有较深的颜色，直接测定；待测物质是无色或很浅的颜色，需要选适当的试剂与被测离子反应生成有色化合物再进行测定，此反应称为显色反应，所用的试剂称为显色剂。（1）类型按显色反应的类型来分，主要有氧化还原反应和络合反应两大类，而络合反应是最主要的。一、显色反应及其条件的选择（2）显色反应的选择A选择性好，干扰少，或干扰容易消除;灵敏度高，有色物质的κ应大于104L·mol-l·cm-1。B有色化合物的组成恒定，符合一定的化学式。C有色化合物与显色剂之间的颜色差别要大，即显色剂对光的吸收与络合物的吸收有明显区别，要求两者的吸收峰波长之差Δλ(称为对比度)大于60nm。D有色化合物的化学性质稳定，至少保证在测量过程中溶液的吸光度基本恒定。这就要求有色化合物不容易受外界环境条件的影响。E显色反应的条件应易于控制。2、显色剂（1）无机显色剂：不多，因为生成的络合物不稳定，灵敏度和选择性也不高。如用KSCN显色测铁、钼、钨和铌；用钼酸铵显色测硅、磷和钒;用H2O2显色测钛等。（2）有机显色剂：分子中含有生色团和助色团。生色团是某些含不饱和键的基团，如偶氮基、对醌基和羰基等。这些基团中的π电子被激发时需能量较小，可吸收波长200nm以上的可见光而显色。助色团是含孤对电子的基团，如氨基、羟基和卤代基等。这些基团与生色团上的不饱和键作用，使颜色加深。3、显色条件的选择实验条件包括:溶液酸度，显色剂用量，试剂加入顺序，显色时间，显色温度，有机络合物的稳定性及共存离子的干扰等。（1）溶液的酸度M+HR===MR+H+*影响被测金属离子的存在状态*影响显色剂的平衡浓度和颜色*影响络合物的组成*pH与吸光度关系曲线确定pH范围*应为A最大且恒定的区间2、吸收光谱产生的原理*吸收光谱分为：原子吸收光谱和分子吸收光谱。是因物质对不同波长的光具有选择性吸收作用而产生的。*原子吸收光谱Atomicabsorptionspectrum由原子外层电子选择性地吸收某些波长的电磁波而引起的，为线状光谱。线状光谱-Linespectrum*分子吸收光谱-带状光谱molecularabsorptionspectrum→由电子能级跃迁而产生吸收光谱[能量差在1~20(eV)]，为紫外及可见分光光度法。UV/VisSpectrophotometry→由分子振动能级(能量差约0.05~leV)和转动能级(能量差小于0.05eV)的跃迁而