荧光原位杂交技术检测hTERC基因：宫颈癌筛查的新视角与应用.docxVIP

荧光原位杂交技术检测hTERC基因：宫颈癌筛查的新视角与应用

一、引言

1.1研究背景与意义

宫颈癌是全球范围内严重威胁女性健康的常见恶性肿瘤之一。据世界卫生组织国际癌症研究机构（IARC）发布的2020年全球癌症负担数据显示，当年全球宫颈癌新发病例约60.4万，死亡病例约34.2万，在女性癌症发病和死亡原因中均位居前列。在中国，2022年新发宫颈癌病例15.1万例，发病率为13.8/10万，居女性癌症发病的第五位，死亡病例5.6万例，死亡率为4.5/10万，居女性癌症死亡的第六位，防治形势严峻。

近年来，宫颈癌的发病呈现出年轻化趋势，这与现代人生活方式的改变密切相关，如性伴侣增多、初次性生活年龄提前、生活不规律以及吸烟等不良生活习惯，都增加了人乳头瘤病毒（HPV）的感染风险，而HPV持续感染正是宫颈癌发生的主要致病因素。虽然HPV疫苗的接种和宫颈癌筛查工作在一定程度上降低了宫颈癌的发病率和死亡率，但目前仍存在诸多挑战。

早期筛查对于宫颈癌的防治至关重要。从HPV感染发展为宫颈癌通常是一个漫长的过程，从感染到癌前病变一般需要5年左右，从癌前病变进展到宫颈癌大概需要10-20年。在这一过程中，通过有效的早期筛查手段，能够及时发现癌前病变，采取相应的治疗措施，从而阻断其向宫颈癌发展，显著提高患者的生存率和生活质量。然而，目前普及的宫颈癌筛查方法，如宫颈细胞学检查（Pap试验），虽然能够在一定程度上早期发现宫颈癌前病变，但其准确率有限，存在较高的假阴性和假阳性率，尤其对于低级别宫颈上皮内瘤变的检测率较低，容易导致漏诊和误诊，影响患者的早期诊断和治疗。

因此，寻找更为准确、有效的早期诊断指标和筛查方法迫在眉睫。hTERC基因（人类染色体端粒酶基因）位于人类染色体3q26.3-q27区域，其表达与恶性肿瘤的发生、发展密切相关。在宫颈癌变过程中，hTERC基因扩增是早期事件，几乎所有宫颈细胞由非典型性增生向宫颈癌转变的过程都伴有3号染色体长臂（3q）的扩增，其中hTERC基因是涉及到的最重要基因之一。hTERC基因扩增可使细胞永生化，从而导致肿瘤产生，且其扩增率与宫颈病变严重程度密切相关，检测hTERC基因状态对于预测宫颈高度病变具有重要意义。

荧光原位杂交技术（Fluorescenceinsituhybridization，FISH）作为一种高灵敏度的分子生物学技术，能够在细胞水平上直接检测染色体、基因、蛋白质和RNA分子。它基于确认目标分子的序列，合成相应的探针，利用荧光标记对探针进行标记，然后探针与待检分子进行杂交，通过荧光显微镜观察标记物是否与待测物识别，从而得出相关信息，可检测到细胞中很少的DNA分子以及微小的基因突变。将FISH技术应用于检测宫颈脱落细胞中hTERC基因的表达，为宫颈癌的早期筛查提供了新的思路和方法，有望提高癌前病变的检测率，弥补传统筛查方法的不足，帮助鉴别宫颈上皮内瘤变的级别和恶性程度，为临床提供更加精准的诊断和治疗策略。深入研究FISH技术检测hTERC基因在宫颈癌筛查中的应用，对于完善宫颈癌早期筛查体系、提高筛查准确性、降低宫颈癌的发病率和死亡率具有重要的现实意义，也将为宫颈癌的防治工作提供有力的技术支持和理论依据。

1.2国内外研究现状

在国外，FISH技术检测hTERC基因用于宫颈癌筛查的研究开展较早。Heselmeyer-Haddad等学者率先应用FISH技术检测宫颈脱落细胞hTERC基因扩增，研究发现低度病变（LSIL）中hTERC阳性率为7%，高度病变（HSIL）为76%，四倍体细胞数和hTERC表达水平随病变的严重程度而增加，由此认为hTERC检测可作为筛查HSIL的独立指标，为后续相关研究奠定了基础。此后，众多研究围绕hTERC基因扩增与宫颈癌前病变及宫颈癌的关系展开。有研究表明，在不同级别宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈癌组织中，hTERC基因扩增率呈现明显差异，随着病变程度加重，hTERC基因扩增率显著上升，这进一步证实了hTERC基因扩增与宫颈病变严重程度的密切相关性，凸显了其在宫颈癌早期筛查中的潜在价值。

国内对于FISH技术检测hTERC基因筛查宫颈癌的研究也逐渐深入。魏丽惠教授等的研究组进行了相关探索，初步研究结果显示，hTERC的扩增率与宫颈病变严重程度密切相关，在宫颈癌筛查中，可弥补TCT和HC2检测HPVDNA的不足。柳晓春、邓凯贤等人选择2010年5月至2012年1月因宫颈异常在佛山市妇幼保健院宫颈门诊行TCT检查的患者100例为研究对象，同时行HC2检测高危