第40讲 基因工程及生物技术安全性与伦理问题-高考生物一轮复习课件.pptxVIP

;;目标要求;基因工程;;;4.识别序列;5.切割结果;（2）产生平末端;1.请结合右图，推断EcoRⅠ限制酶

切一次可断开个磷酸二酯键，

产生个游离的磷酸基团，

消耗分子水，

产生个黏性末端。;习题巩固;5.下图甲是一个DNA片段，箭头处代表不同限制酶的切点，

据图回答：;6.写出下列限制酶切割形成的黏性末端;重组DNA技术的基本工具;;;项目;2.根据所学知识，完成以下填空。;3.请判断：DNA片段经限制酶处理后产生的相同黏性末端，

再经过DNA连接酶处理后，形成的新的识别序列，

能否再被所用的限制酶识别？;重组DNA技术的基本工具;2.最常用的载体——质粒;3.运载体需具备的条件;标记基因的筛选原理;载体上的标记基因一般是某种抗生素的抗性基因，而受体细胞没有抵抗该抗生素的能力。将含有某抗生素抗性基因的载体导入受体细胞，抗性基因在受体细胞内表达，受体细胞对该抗生素产生抗性。在含有该抗生素的培养基上，能够生存的是被导入了载体的受体细胞。;用相同的限制酶切割目的基因和运载体。

产生相同末端，便于连接。;用同一种限制酶或产生相同黏性末端的限制酶（同尾酶）分别切割质粒和含有目的基因的DNA片段。;;用两种限制酶切割质粒和含有目的基因的DNA片段;限制酶a切割;2.图甲是含有目的基因

的外源DNA片段，图乙

是用于将目的基因导入受体细胞的质粒（阴影部分表示抗生素抗性基因），相关限制酶的作用部位如图所示，现欲培养转基因抗病植株，回答下列问题。;①切割目的基因时：。

②切割质粒时：。;3.目的（外源）基因在受体细胞中为什么能表达？;;习题巩固;习题巩固;习题巩固;习题巩固;2.DNA在不同浓度的___________中溶解度不同，

它能溶于___________的NaCl溶液。;二、材料用具;三、方法步骤;;在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液（体积分数为95%），静置2~3min，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，??用滤纸吸去上面的水分；或者将溶液倒入塑料离心管中，在10000r/min的转速下离心5min，弃上清液，将管底的沉淀物（粗提取的DNA）晾干。;4.DNA的鉴定;习题巩固;2.(2024·梅州一模)以菜花为材料提取DNA时，需将材料进行研磨，研磨液的成分常含有SDS(蛋白质变性剂)、EDTA(DNA酶抑制剂，稳定DNA活性)、Tris(缓冲剂)。下列有关叙述错误的是()

A.若选择鸡血细胞为材料，则省去了研磨过程

B.SDS可以使蛋白质变性，便于DNA与蛋白质分离

C.EDTA可以防止DNA水解成核糖核苷酸

D.Tris可以调节溶液中的pH;习题巩固;;苏云金杆菌;当Bt抗虫蛋白被分解为多肽后，多肽与害虫肠上皮细胞的特异性受体结合，导致细胞膜穿孔，最后造成害虫死亡。;基因工程的操作程序;2.目的基因的获取方法;①基因组文库的构建;含有某种生物部分基因片段的重组DNA的克隆群体。;质粒;文库类型;2.目的基因的获取方法;2.目的基因的获取方法;③体外DNA复制所需的基本条件;;;引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。用于PCR的引物通常为20~30个核苷酸。在细胞中为一段单链RNA，在PCR中为一段人工合成的单链DNA。;1.延伸时需要加入两种引物，原因是:;参与的组分;（3）利用PCR获取和扩增目的基因;;思考：复性的过程一定是引物与DNA模板链结合吗？;;DNA解链为单链;④PCR的过程;目的基因DNA________后________，____与单链相应互补序列

结合；然后以_________为模板在作用下进行_____，即将4种___________加到___________，如此重复循环多次。;利用PCR获取和扩增目的基因条件;;长链-中长链DNA____个;中长链-短链DNA____个;中长链-短链DNA____个;扩增次数;一个DNA，一对引物（A与B），通过PCR扩增