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生物技术通报

·研究报告·BIOTECHNOLOGYBULLETIN2025,41(2):210-220

茶树CsWAK8克隆及其在响应冷胁迫过程中的功能分析

刘丹丹孙明慧阮旭王文杰

焦小雨吴琼包王雷刚

（安徽省农业科学院茶叶研究所，合肥230001）

摘要：【目的】细胞壁关联蛋白激酶（wallassociatedkinase，WAK）是一类特殊的类受体激酶（receptorlikekinase，

RLK)，其在调节植物生长和应对生物或非生物胁迫等方面发挥着重要作用。探究CsWAK8在响应冷胁迫过程中的功能，为今后解

析茶树抗寒机理提供理论依据。【方法】从茶树叶片中克隆了CsWAK8。采用实时荧光定量PCR（qPCR）分析CsWAK8在不同组织

以及越冬期不同抗寒性茶树品系中的表达模式。通过农杆菌介导法在拟南芥中异源表达CsWAK8，并对转基因植株进行冷处理表型

观察、酶活测定和冷响应相关基因表达检测。【结果】CsWAK8的CDS全长2307bp，编码768个氨基酸，具有WAK家族特征保守

结构域。CsWAK8在茶树成熟叶片中高表达，在越冬期，冷敏感型茶树品系叶片和根中CsWAK8表达量多显著高于冷耐受型茶树品

系。通过异源过表达获得了9株转CsWAK8拟南芥纯合株系，对其中3个株系进行了耐冷性分析，发现在冷胁迫下，转基因株系的

根长和存活率显著低于野生型，盆栽苗莲座叶的枯死程度较野生型更高，且转基因株系L48在冷冻处理6h时的MDA含量显著高于

野生型。此外，qPCR分析结果显示，在冷胁迫下，转CsWAK8拟南芥中AtCBFs的相对表达量大多显著低于野生型。【结论】转

CsWAK8拟南芥相较于野生型拟南芥对冷处理更敏感。CsWAK8可能通过CBF介导的冷信号途径在响应和耐受冷胁迫过程中起负调

节作用。

关键词：茶树；细胞壁关联蛋白激酶（WAK)；基因克隆；功能验证；冷胁迫

DOI:10.13560/ki.biotech.bull.1985.2024-0542

CloningandFunctionalAnalysisofCsWAK8GenefromCamellia

sinensisduringColdStress

gWANGWen-jie

JIAOXiao-yuWUQiongLIUDan-danSUNMing-huiRUANXuWANGLei-gang

(TeaResearchInstitute,AnhuiAcademyofAgriculturalSciences,Hefei230001)

Abstract:[ObjectivelThewall-associatedkinase(WAK)isauniqueclassofreceptor-likekinase(RLK)thatplaysanimportantrolein

regulatingplantgrowthandrespondingtobothbioticandabioticstresses.ExploringthefunctionofCsWAK8inrespondingtocoldstressmay

provideatheoreticalbasisforfurtheranalysisofthecoldresistancemechanismsinCameliasinensis.[Method]TheCsWAK8genewas

clonedfromthel