发酵生产染菌及防治课件.pptVIP

第二節發酵異常現象及原因分析表6-3上海天廚味精廠谷氨酸發酵染菌原因分析染菌原因染菌百分率/%染菌原因染菌百分率/%空氣系統染菌32.05補料、取樣帶菌4.30設備問題15.46種子帶菌1.72管理和操作不當11.34環境污染及原因不明35.13第二節發酵異常現象及原因分析1．染菌的雜菌種類分析對於每一個發酵過程而言，污染的雜菌種類的影響是不同的。如在抗生素的發酵過程中，青黴素的發酵污染細短產氣桿菌比粗大桿菌的危害更大；鏈黴素的發酵污染細短桿菌、假單胞桿菌和產氣桿菌比污染粗大桿菌更有危害；四環素的發酵過程最怕污染雙球菌、芽孢桿菌和夾膜桿菌；檸檬酸的發酵最怕青黴菌的污染；谷氨酸發酵最怕噬菌體污染。因噬菌體蔓延迅速，難以防治，容易造成連續污染。若污染的雜菌是耐熱的芽孢桿菌，可能是由於培養基或設備滅菌不徹底、設備存在死角等引起；若污染的是球菌、無芽孢桿菌等不耐熱雜菌，可能是由於種子帶菌、空氣過濾效率低、除菌不徹底、設備滲漏和操作問題等引起；若污染的是真菌，就可能是由於設備或冷卻盤管的滲漏、無菌室滅菌不徹底或無菌操作不當、糖液滅菌不徹底（特別是糖液放置時間較長）而引起。第二節發酵異常現象及原因分析2．發酵染菌的規模分析從染菌的規模來看，主要有三種。（1）大批量發酵罐染菌如發生在發酵前期，可是種子帶菌或連消設備引起染菌；如果染菌發生在發酵中期、後期，且這些雜菌類型相同，則一般是空氣淨化系統存在諸如空氣系統結構不合理、空氣篩檢程式介質失效等問題；如果空氣帶菌量不多，無菌試驗的顯現時間較長，這就使分析防治空氣帶菌增加了難度。第二節發酵異常現象及原因分析（2）部分發酵罐染菌如果染菌發生在發酵前期，就可能是種子染菌、連消系統滅菌不徹底；如果是發酵後期染菌，則可能是中間補料染菌，如補料液帶菌、補料管滲漏。（3）個別發酵罐連續染菌此時如果採用間歇滅菌工藝，一般不會發生連續染菌。個別發酵罐連續染菌，大都是由於設備滲漏造成，應仔細檢查閥門、罐體，或罐器是否清潔等。一般設備滲漏引起的染菌，會出現每批染菌時間向前推移的現象。第二節發酵異常現象及原因分析3．不同污染時間分析從發生染菌的時間來分析，也是三種情況。（1）染菌發生在種子培養階段或稱種子培養基染菌。此時通常是由種子帶菌、培養基或設備滅菌不徹底，以及接種操作不當或設備因素等原因而引起染菌。（2）在發酵過程的初始階段發生染菌或稱發酵前期染菌。此時大部分染菌也是由種子帶菌、培養基或設備滅菌不徹底，以及接種操作不當或設備因素、無菌空氣帶菌等原因而引起。（3）發酵後期染菌大部分是由空氣過濾不徹底、中間補料染菌、設備滲漏、泡沫頂蓋以及操作問題而引起染菌。第三節雜菌污染的途徑和防治從技術上分析，染菌的途徑不外有以下幾方面：種子包括進罐前菌種室階段出問題；培養基的配製和滅菌不徹底；設備上特別是空氣除菌不徹底和過程控制操作上的疏漏。遇到染菌首先要監測雜菌的來源。對頑固的染菌，應對種子、消後培養基和補料液、發酵液及無菌空氣取樣作無菌試驗以及設備試壓檢漏，只有系統、嚴格監測和分析才能判斷其染菌原因，做到有的放矢。第三節雜菌污染的途徑和防治種子帶菌的檢查可從菌種室保藏的菌種、斜面、搖瓶直到種子罐。保藏菌種定期作復壯、單孢子分離和純種培養；斜面、搖瓶和種子罐種子作無菌試驗，可以用肉湯和斜面或平板培養基檢查有無雜菌。顯微鏡檢觀察菌形是否正常，應注意在顯微鏡檢不出雜菌時不等於真的無雜菌，需作無菌試驗才能最後肯定。培養基和設備沒消透的原因有多方面，如蒸汽壓力或滅菌時間不夠，培養基配料未混合均勻，存在結塊現象，設備未清洗乾淨，特別是罐沖洗不到的犄角處，有結痂而未剷除乾淨。第三節雜菌污染的途徑和防治設備方面特別是老設備也常會遇到各種問題，如夾層或盤管、攪拌軸密封封和管道的滲漏，空氣除菌的效果差，管道安裝不合理，存在死角等是造成染菌的重要原因。過程控制主要包括接種、過程加糖補料和取樣操作等是否嚴密規範。一級種子罐的接種可分為血清瓶針頭或管道方式或火焰敞口式接種，罐與罐之間的移種前管道沖洗或滅菌不當也會出問題。第三節雜菌污染的途徑和防治一、種子帶菌及其防治由於種子帶菌而發生的染菌率雖然不高，但它是發酵前期染菌的重要原因之一，是發酵生產成敗的關鍵，因而對種子染菌的檢查和染菌的防治是極為重要的。種子帶菌的原因主要有保藏的斜面試管菌種染菌、培養基和器具滅菌不徹底、種子轉移和接種過程染菌以及種子培養所涉及的設備和裝置染菌