CD133阳性细胞在鼻咽癌研究中的探索：分离技术、功能特性与临床意义.docxVIP

CD133阳性细胞在鼻咽癌研究中的探索：分离技术、功能特性与临床意义

一、引言

1.1研究背景与目的

鼻咽癌（nasopharyngealcarcinoma,NPC）是一种在我国南方及东南亚地区尤为常见的恶性肿瘤，在广东省珠江三角洲一带发病率颇高，因此有“广东瘤”之称。近年来，虽然鼻咽癌的治疗手段不断发展，但由于鼻咽部淋巴组织丰富，肿瘤易于早期转移，且对化疗相对不敏感，转移及治疗后的复发依然是导致鼻咽癌患者死亡的主要原因。目前，鼻咽癌发生发展，特别是转移的机制尚未完全明确，这严重制约了临床治疗效果的进一步提升，亟待深入研究。

肿瘤干细胞学说的提出为肿瘤研究带来了全新的视角。该学说认为，肿瘤细胞并非均一群体，其中存在一小部分具有干细胞性质的细胞，即肿瘤干细胞。这些肿瘤干细胞具有自我更新及多向分化潜能，是肿瘤发生、发展、转移、复发以及对抗放化疗的根源。肿瘤干细胞理论为解释肿瘤的异质性、难治性和复发等问题提供了重要依据，也为肿瘤治疗提供了新的方向和靶点。

CD133作为一种重要的干细胞标记物，在多种实体肿瘤，如肝癌、结肠癌、脑肿瘤、肺癌和前列腺癌及B16黑色素瘤等的干细胞研究中发挥着关键作用。大量研究表明，CD133阳性肿瘤细胞与肿瘤的发生、侵袭、转移、耐药及复发密切相关。例如，在脑肿瘤研究中，Singh等证实CD133阳性细胞具有显著的增殖能力、自我更新能力和分化能力，将少至100个CD133阳性细胞接种到NOD/SCID小鼠脑组织就能形成肿瘤，传代后能够连续接种，且在小鼠组织中形成的肿瘤与患者原发肿瘤表型相同，而CD133阴性细胞多达1×10?个细胞却不能形成肿瘤。在结肠癌研究中，OBrien等将结肠癌组织中的CD133阳性细胞移植到NOD/SCID小鼠肾被膜下，发现所有结肠癌致瘤细胞（CIC）都是CD133阳性细胞，而那些CD133阴性细胞没有致瘤性。然而，在鼻咽癌领域，CD133与鼻咽癌的关系目前还知之甚少。CD133在鼻咽癌细胞的表达情况如何，鼻咽癌CD133阳性细胞的生物学行为与CD133阴性细胞有何不同，以及鼻咽癌细胞CD133与侧群（sidepopulation,SP）表型之间的关系，目前尚不清楚。

本研究旨在通过对鼻咽癌细胞株中CD133阳性细胞的分离与功能分析，深入探讨CD133在鼻咽癌发生发展中的作用机制，为鼻咽癌的临床治疗提供新的靶向治疗靶点，以期提高鼻咽癌患者的生存率和生活质量。具体研究内容包括：利用流式细胞仪检测并分离出鼻咽癌细胞株中的CD133阳性与CD133阴性细胞，通过激光共聚焦及流式细胞术检测分选纯度，然后通过体外实验比较两者在自我更新、增殖、分化、迁移等方面的能力差异；运用流式细胞仪分析鼻咽癌细胞株中SP细胞与CD133阳性细胞的关系，为全面揭示鼻咽癌的发病机制和寻找有效的治疗策略奠定基础。

1.2国内外研究现状

在鼻咽癌的研究方面，国内外学者已经取得了一定的成果。鼻咽癌在我国南方地区的高发病率引起了广泛关注，相关流行病学研究较为深入，明确了其发病与EB病毒感染、遗传因素、环境因素（如长期食用咸鱼等腌制食品）等密切相关。在治疗手段上，放疗是鼻咽癌的主要治疗方法，随着调强放疗技术的普及和综合治疗（如同步放化疗、诱导化疗联合放疗等）的应用，鼻咽癌患者的局部控制率和5年生存率有了显著提高。中山大学肿瘤防治中心的相关研究成果表明，调强放疗技术使鼻咽癌患者的局部控制率达90%以上，5年生存率超过80%。然而，对于复发转移的鼻咽癌患者，目前的治疗效果仍不理想，中位无进展生存期较短，成为临床诊疗的难点。

在肿瘤干细胞领域，国外的研究起步较早，诸多研究证实了肿瘤干细胞在多种肿瘤发生、发展、转移和复发中的关键作用。例如，在白血病研究中，最早发现了白血病干细胞，其具有独特的细胞表面标志，如急性髓性白血病细胞中具有CD34+CD38-的细胞具有分化和增殖能力，注射入NOD/SCID小鼠能促发人急性髓性白血病。在实体瘤研究方面，乳腺癌干细胞的发现揭示了肿瘤干细胞在实体瘤中的存在及特性，少量的乳腺癌干细胞就能在小鼠中产生肿瘤，其成瘤能力比普通肿瘤细胞强数百倍以上。

CD133作为一种重要的干细胞标记物，在国外已被广泛研究。在脑肿瘤研究中，Singh等通过一系列实验证实CD133阳性细胞具有显著的增殖、自我更新和分化能力，将少至100个CD133阳性细胞接种到NOD/SCID小鼠脑组织就能形成肿瘤，且传代后能够连续接种，形成的肿瘤与患者原发肿瘤表型相同。在结肠癌研究中，OBrien等将结肠癌组织中的CD133阳性细胞移植到NOD/SCID小鼠肾被