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馥联霓痘测定生辖尿滚审曲盐酸竟伦籍

刘维红，秦玲，厉磊

（山东省临沂市畜牧兽医检测中心，临沂２７６００３）

盐酸克伦特罗（ＣＬＢ）俗名“瘦肉精”，是一种化学合成类４．２将样品和标准品对应微孔按顺序编号，每个样品和标准

物质，曾被国内外当作“促生长剂”和“营养重分配剂”被广泛品做两个平行实验。

用于生猪的饲养中，以促进家畜生长，提高瘦肉率，从而获取４．３每孑Ｌ加人１００Ｌ稀释后的抗体溶液，室温下孵育１５ｍｉｎ。

更大的经济效益。ＣＬＢ在动物体内代谢慢，易形成累积性残４．４倒出孔中的液体，将反应板倒置在吸水纸上拍打，然后

留，通过食物链直接危害人的身体健康。人若食用含有过量用蒸馏水洗涤３次（保证每孔都充满液体），最后一次洗板

ＣＬＢ的食品，会引起一系列的心血管系统和神经系统的不良后，甩干液体，于吸水纸上倒置拍干。

反应症状，严重危害人体健康。因此，各国政府都禁止ＣＬＢ４．５在各自对应的微孔中加入２０的标准品和Ｉ处理好的样

作为饲料添加剂用于肉用动物的生产中。检测ＣＬＢ的常用品，然后加入１００Ｌ稀释的酶标记物，小心地使酶标板在平面

方法有高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）、气质联机法（ＧＣ—ＭＳ）和酶上做圆周运动，室温孵育３０ｍｉｎ。

联免疫吸附测定法（ＥＨＳＡ）等。克伦特罗单克隆抗体ＥＬＩＳＡ４．６重复４．４

试剂盒的应用，打破了ＣＬＢ残留的检测仅限于拥有先进仪器４．７向每孔中加入１００Ｌ基质／发色剂，轻轻混匀后，室温避

的检测单位能够检测的现状，使得基层单位、生产企业现场光孵育１５ａｒｉｎ。

快速检测成为可能，扩大了我国ＣＬＢ残留的检测范围和检测４．８向每孔中加人１００Ｌ终止液，６０ａｒｉｎ内测定４５０ｎｍ处的

数量，使得国家兽药残留监控计划得到更好的实施。吸光度值。

本文利用酶联免疫吸附法对生猪尿液中的ＣＩＢ进行测定。５读数与计算

１测定原理５．１读数在波长４５０ｎｍ处读出进样的吸光度值。

测定的基础是抗原抗体反应。单克隆抗体既能与ＣＬＢ５．２标准曲线的绘制用获得的标准溶液和样品的吸光度

结合，也能与酶标记物结合。当样品中含有ＣＬＢ时，它与酶值的平均值除以空白溶液的比值再乘以１００。计算的标准值

标记物竞争性的结合单抗上的结合位点，经过洗涤步骤后，绘成一个对应ＣＬＢ浓度的半对数坐标系统曲线图，校正曲线

没有与单抗结合的酶标记物被洗去。加入基质和发色剂后，在２００～２０００ｐｐｔ的范围内应当成为线性。

结合的酶标记物把无色的发色剂转化为蓝色的产物，颜色的５．３计算每一个样品的浓度可以从校正曲线上读出。

深浅和样品中ＣＬＢ的浓度有关。加入终止液后，蓝色转变为６判定

黄色，然后用酶标仪进行测定，吸光度值与样品中的ＣＬＢ的尿样中盐酸克伦特罗浓度超过０．１ｎ￣ｍＬ者判为阳性。

浓度成反比。７注意事项

２试剂和仪器７．１不同批号的试剂不要交叉使用；所有试剂使用之前均应

２．１试剂克伦特罗试剂盒（德国ｒ—Ｂｉｏｐｈａｒｍ公司）回升至室温，使用之后应立即放回２～８℃。由于酶标记物和

２．２仪器设备酶标仪、冰箱、恒温箱、振荡器、离心机、微量抗体的稳定性不好，所以使用时只稀释实际用量即可，用前

移液器。