探究墨角藻调雌性SD大鼠和人卵巢黄素化颗粒细胞内分泌激素的作用机理.docVIP

探究墨角藻对雌性SD大鼠和人卵巢黄素化颗粒细胞内分泌激素的影响

摘要：流行病学研究报告表明：典型的亚洲膳食人群跟西方膳食人群相比有较低的激素依赖性癌症发病率这些膳食上的差别使得亚洲人摄取了更多的大豆。然而我们实验室的研究结果表明：海带的抗雌激素作用可能同样有利于减少癌症的发病率。以下针对绝经前女性做的海带摄入量跟内分泌调节之间的相关关系实验，我们研究了海带（墨角藻）对雌性大鼠和人卵巢黄素化颗粒细胞(hLGC)的内分泌调节作用。海带会影响大鼠的发情周期：175mg·kg-1wt·d-1(P=0.05)4.3±0.96d5.4±1.7d；350mg·kg-1wt·d-1(P=0.002)5.9±1.9d,并且100%延长了大鼠的发情周期(P=0.02)。按照175mg·kg-1wt·d-1的剂量喂养大鼠两周，17β-雌二醇水平从48.9±4.5下降到40.2±3.2ng/L(P=0.13).四周后，17β-雌二醇水平下降到36.7±2.2ng/L(P=0.02)。卵巢黄素化颗粒细胞,23,50以及75μmol/L剂量分别使17β-雌二醇水平从4732±591下降到3632±758,3313±373，3060±538ng/L。海带摄入量同样能提升卵巢黄素化颗粒细胞培育孕激素的水平。海带提取物的IC值分别为42.4,31.8和40.7时能抑制雌激素和雌激素受体α和β，孕激素和孕激素受体之间的结合。这些数据表明海带的内分泌调剂作用根基量有关，并且表明膳食中含较多海带是日本地区激素依赖性疾病发病率如此之少的原因。

关键字：墨角藻；大鼠；海带；乳腺癌；内分泌

美国的激素依赖性癌症发病率逐年上涨，我们在预防这些癌症上取得的微不足道的成果都让我们对日本的膳食越来越感兴趣，因为日本是世界上乳腺癌、子宫癌、卵巢癌发病率最低的国家之一。研究调查结果显示，日本女性跟一同参加测试的西方女性相比，有较长的生理周期和较低的血清雌二醇水平，这些都可能是她们面临较低的激素依赖性癌症威胁的原因。到目前为止，亚洲人群中部分天生偏向选择富含大豆膳食有利于降低这些癌症的发病率。然而，Teas等人之前的假设是另一个有利因素可能是他们较高的海带摄入量。在人体实验中，我们研究了墨角藻摄入量显著增加了生理周期的天数，减少了循环中的17β-雌二醇水平，并且提升绝经前有异常生理周期史的女性的血清孕酮水平。现阶段的研究中，我们深入研究了在大鼠和人体内墨角藻调节内分泌激素对性激素和循环系统的作用。之前有研究表明，生理周期长度跟乳腺癌、子宫癌、卵巢癌之间有反相关关系。生理周期长度，月经初潮时的年龄以及孕激素都可以作为反映内源性雌二醇和更年期年龄的指标。生理周期较短的女性跟生理周期较长的女性相比吗，在她们的整个生殖周期中会有较多的月经次数。因此，那些女性就会在生殖周期中花费更多的时间在产生卵泡和黄体阶段，这个阶段中雌激素和孕激素水平，子宫内膜和乳腺细胞都是处在最高的增殖率。也曾有报道指出，乳腺癌、子宫癌、卵巢癌、肥胖、酒精摄入量这些因素跟持续刺激雌激素以及性激素失衡之间都有正相关关系。那些实验研究表明，暴露的雌激素，雌激素和孕酮的的比例失衡可能是雌激素依赖型疾病最至关重要的影响因素。在预防一些雌激素依赖性疾病的治疗过程，还有高危个体的防御措施中，现阶段主要的策略就是阻止雌激素通过雌激素受体或者封锁芳香化酶。进一步的措施是，识别发挥化学保护作用抑制内源性雌激素产生的膳食成分，这也许可能降低乳腺癌、子宫癌、卵巢癌额发病率。

利用大鼠和人体原发性卵巢黄素化颗粒细胞检测化学性内分泌干扰物用来降低癌症威胁。以雌性SD大鼠为实验对象来研究内分泌调节对乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌作为模板参考。因为人和大鼠的卵巢分泌荷尔蒙具有相似性，所以一般用大鼠模型测试化学性内分泌干扰物。大鼠的发情期和人的生理周期中，雌二醇水平在发情期前和产卵期时达到峰值，孕激素水平在发情期和产黄体期时达到峰值。人体原发性卵巢黄素化颗粒细胞显著的刺激了黄体的产生，因为它们支持及时的在循环中动态选择雌二醇和孕激素，在生理周期中的黄体期模拟血清激素水平。卵巢黄素化颗粒细胞培养成功应用到研究化学性内分泌干扰物，比如说二噁英对卵巢雌激素和孕激素合成的作用。

我们本次实验的目的就是建立起我们之前研究的实验模型：1)检测膳食中控制墨角藻的摄入量是否会扰乱SD大鼠正常的发情周期和性激素的分泌2)利用墨角藻的提取物培养人体原发性卵巢黄素化颗粒细胞以研究颗粒细胞中的激素反映。为了进一步深入研究墨角藻提取物对对雌激素和孕激素的反映，我们评价它的结合雌激素受体α、β，孕激素受体亲和力，以及它在培养人体原发性卵巢黄素化颗粒细胞中潜在的阻止芳香化酶活力的作用。

材料和方法

大鼠及其发情周期的检测

24只重量200-250g的成年雌性SD大鼠，安置它们独自在铁丝笼