核酸的降解和核苷酸的代谢.pptVIP

“从头合成”中碱基各原子来源通过放射性同位素法推断嘌呤碱天冬氨酸谷氨酰胺甘氨酸甲酸甲酸磷酸核糖C1上逐个安插成嘌呤碱成分，形成A(G)MP。CO2第30页，共44页，星期日，2025年，2月5日与嘌呤核苷酸合成不同，在合成嘧啶核苷酸时，首先合成嘧啶环，再与磷酸核糖结合，生成尿嘧啶核苷酸，最后由尿嘧啶核苷酸转化为胞嘧啶核苷酸。二、嘧啶核苷酸的合成1、?从头合成第31页，共44页，星期日，2025年，2月5日核酸的降解和核苷酸的代谢第1页，共44页，星期日，2025年，2月5日一、核酸的酶促降解二、核苷酸的生物降解三、核苷酸的生物合成主要内容本章重点讨论核酸酶的类别和特点，对核苷酸的生物合成和分解代谢作一般介绍。第2页，共44页，星期日，2025年，2月5日核酸核酸酶单核苷酸磷酸单脂酶核苷嘧啶（嘌呤）核苷酶核苷磷酸化酶嘧啶（嘌呤）核糖-1-磷酸脱氧核糖-1-磷酸核糖-5-磷酸磷酸戊糖途径醛缩酶乙醛甘油醛-3-磷酸核酸是核苷酸以3’、5’-磷酸二酯键连成的高聚物，核酸分解代谢的第一步就是分解为核苷酸，作用于磷酸二酯键的酶称核酸酶（实质是磷酸二脂酶），即水解核酸的酶。第3页，共44页，星期日，2025年，2月5日根据对底物的专一性分为核糖核酸酶(RNase)：只水解RNA磷酸二酯键的酶（RNase）脱氧核糖核酸酶(DNase)：只能水解DNA磷酸二酯键的酶。非特异性核酸酶：既可水解RNA，又可水解DNA磷酸二酯键的核酸酶根据切割位点分为核酸内切酶核酸外切酶1.核酸酶核酸酶的分类第4页，共44页，星期日，2025年，2月5日蛇毒磷酸二酯酶能从RNA或DNA链的游离的3’-OH逐个水解，生成5’-核苷酸。牛脾磷酸二酯酶从游离的5’-OH开始逐个水解，生成3’-核苷酸。非特异性核酸酶,核酸外切酶2、核酸酶的作用特点第5页，共44页，星期日，2025年，2月5日内切核酸酶对RNA的水解位点示意图5′ppppOHPyPuPyPy1′pppGACUpppGA3′RNAaseIRNAaseIRNAaseT1RNAaseT1Pu：嘌呤Py：嘧啶第6页，共44页，星期日，2025年，2月5日将核酸从内部分解成较小的核苷酸链。很多核酸内切酶无选择性。但在某些细菌和蓝藻中，存在一类特殊的核酸内切酶，称为限制性核酸内切酶。这类酶在双链DNA上能识别特殊的核苷酸序列。限制性核酸内切酶（restrictionendounuclease）是一类具有极高专一性，在特殊核苷酸序列（4~8碱基回文序列）处，识别并切割外源双链DNA，形成黏性末端（由限制性内切酶切割后，在双链DNA的切口处产生交错互补的单链末端）或平齐末端的核酸外切酶，是基因工程的重要工具。生物学功能：降解外源侵入的DNA，但不降解经修饰酶甲基化保护的自身DNA。核酸内切酶第7页，共44页，星期日，2025年，2月5日作用类别：核酸内切酶：磷酸二酯酶，作用点在核酸内部，产物是寡核苷酸链。核酸外切酶：磷酸单酯酶，作用于核酸两端，产物是单核苷酸。RNA:RNase(酶稳定、耐高温)DNA:DNase(种类多、工具酶)第8页，共44页，星期日，2025年，2月5日限制性内切酶

?类型?命名?意义原核生物中存在着一类能识别外源DNA双螺旋中4-8个碱基对所组成的特异的具有二重旋转对称性的回文序列，并在此序列的某位点水解DNA双螺旋链，产生粘性末端或平末端，这类酶称为限制性内切酶（ristrictionendonuclease）。发现：1952，SmithHuman用T4phage感染E.coli.提出了限制与修饰现象。第9页，共44页，星期日，2025年，2月5日限制性内切酶类型I型：分子量大于105，多亚基，需S-线苷蛋氨酸、ATP和Mg2+，识别位点与切割位点相差甚远，产物为异质，是限制与修饰相排斥的多功能酶.内切、修饰，识别与切割位点不一致Ⅱ型：分子量小于105，需Mg2+，切割位点位于识别位点上，产物为专一性片段，不具修饰酶功能。现在分子生物学研究所用的限制性内切酶均为此类。识别与切割位点统一ⅡI型：识别位点为5-7bp的非对称序列，切割位点在顺序之外离识别序列5-10bp，切割双链，个