靶向抑制乳腺癌耐药蛋白：肝细胞癌多药耐药逆转的新曙光.docxVIP

靶向抑制乳腺癌耐药蛋白：肝细胞癌多药耐药逆转的新曙光

一、引言

1.1研究背景与意义

1.1.1肝细胞癌多药耐药的严峻现状

肝细胞癌（HepatocellularCarcinoma，HCC）作为全球范围内常见且致命的恶性肿瘤，严重威胁着人类的生命健康。据统计，2020年全球约有超90万新发病例和超83万死亡病例，在癌症相关死因中位居第三，其中80%以上为肝细胞癌。在我国，肝癌的发病率和死亡率也一直处于较高水平，我国是世界肝癌的第一大国，全球每年约有26万人发病，其中有42.5%发生在中国，肝癌的死亡率为十万分之20.4，每年死亡人数至少达十二万人，占全世界的45%，男性的发病率高于女性，约为二比一。由于肝癌早期症状隐匿，多数患者确诊时已处于中晚期，失去了手术根治的最佳时机，化疗成为重要的治疗手段之一。

然而，肝细胞癌多药耐药（MultidrugResistance，MDR）现象的存在，极大地阻碍了化疗的疗效。多药耐药是指肿瘤细胞对一种化疗药物产生耐药的同时，对其他结构和作用机制不同的化疗药物也产生交叉耐药。这使得原本有效的化疗药物无法发挥应有的细胞毒作用，导致肿瘤细胞持续增殖、转移和复发，严重影响患者的预后。研究表明，MDR是导致肝细胞癌化疗失败和患者生存率低下的主要原因之一，中晚期肝癌患者的5年生存率不足20%。肝细胞癌的高度表型和分子异质性，使其对常规化疗或靶向治疗极易产生耐药，甚至发展为多药耐药，这已成为临床化疗面临的主要障碍。因此，深入研究肝细胞癌多药耐药的机制，并寻找有效的逆转方法，对于提高肝细胞癌的治疗效果、改善患者的生存状况具有迫切的现实需求。

1.1.2乳腺癌耐药蛋白（BCRP）与肝细胞癌多药耐药的关联

乳腺癌耐药蛋白（BreastCancerResistanceProtein，BCRP），又称ABCG2，属于ATP结合盒（ABC）转运蛋白超家族成员。在正常组织中，BCRP参与多种生理功能，如保护正常组织免受内、外源性毒素的侵害，维持组织内环境稳定。但在肿瘤细胞中，BCRP的异常高表达与多药耐药密切相关。在肝细胞癌中，BCRP起着关键的多药耐药介导作用。它作为一种药物外排泵，能利用ATP水解产生的能量，将进入细胞内的化疗药物如阿霉素、拓扑替康等主动转运到细胞外，从而降低细胞内药物浓度，使化疗药物无法达到有效杀伤肿瘤细胞的剂量，最终导致肿瘤细胞对化疗药物产生耐药。

大量研究已证实BCRP在肝细胞癌多药耐药机制中的重要地位。例如，通过培养液中阿霉素（ADM）浓度递增诱导法筛选培养建立的HepG2/ADM肝癌多药耐药细胞株，其BCRPmRNA表达是HepG2细胞的9倍；临床研究也发现，化疗后病人癌组织BCRPmRNA平均表达是未化疗病人癌组织的4.2倍，是癌旁组织的3.4倍。这些研究结果均表明，BCRP的高表达与肝细胞癌多药耐药密切相关。因此，抑制BCRP的表达，有可能阻断其介导的药物外排过程，提高细胞内化疗药物浓度，从而逆转肝细胞癌的多药耐药，为肝细胞癌的治疗开辟新的途径，具有重要的潜在临床应用价值。

1.2研究目的与创新点

1.2.1研究目的

本研究旨在深入探究抑制乳腺癌耐药蛋白（BCRP）表达对逆转肝细胞癌多药耐药的作用及其潜在机制，为肝细胞癌的临床治疗提供新的理论依据和治疗策略。具体目标如下：

明确BCRP在肝细胞癌多药耐药细胞株中的表达特征：运用分子生物学技术，如实时荧光定量PCR、免疫印迹（Westernblot）等，精确检测BCRP在不同肝细胞癌多药耐药细胞株中的mRNA和蛋白表达水平，分析其表达与多药耐药程度之间的相关性，从而为后续研究提供基础数据。

探索抑制BCRP表达对肝细胞癌多药耐药的逆转效果：通过RNA干扰（RNAi）技术或小分子抑制剂，特异性地抑制BCRP的表达，观察其对肝细胞癌多药耐药细胞株耐药性的影响。通过检测细胞内化疗药物浓度、细胞增殖抑制率、细胞凋亡率等指标，评估抑制BCRP表达后多药耐药逆转的程度，为临床治疗提供直接的实验证据。

阐明抑制BCRP表达逆转肝细胞癌多药耐药的分子机制：从信号通路、基因调控、蛋白质-蛋白质相互作用等层面入手，深入研究抑制BCRP表达后，细胞内相关分子事件的变化。如探究BCRP与其他耐药相关蛋白或信号通路之间的相互作用关系，揭示其在多药耐药逆转过程中的关键分子机制，为开发新的治疗靶点提供理论支持。

评估抑制BCRP表达在体内模型中的治疗效果：建立肝细胞癌多药耐药的裸鼠移植瘤模型，在体内验证抑制BCRP表达对肿瘤生长抑制和化疗增敏的作用。通过观察肿瘤体积变化、组织病理学改变、生存