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大鼠腹主动脉二次深低温冻存：可行性、特性及应用前景探究

一、引言

1.1研究背景与意义

血管作为人体至关重要的组成部分，除了角膜、毛发、指（趾）甲、牙质等处外，遍布全身，是血液流经的管道，主要分为动脉、毛细血管和静脉。其中动脉血管由内皮细胞、血管平滑肌细胞和成纤维细胞构成，这些细胞通过复杂的自分泌或旁分泌作用相互调节，维持血管内膜完整，确保血液输送，为组织器官供应富含氧气的血液，保障其正常生理功能。

血管移植在现代医学中占据着举足轻重的地位，在治疗血管源性疾病、组织和器官移植以及肿瘤根治术的循环重建等方面发挥着关键作用。常见的血管源性疾病如动脉硬化性闭塞症、动静脉血栓形成、动脉瘤等，严重威胁着人类健康，血管移植是重要的治疗手段之一；在器官移植领域，由于供体短缺，活体器官移植尤其是活体肝脏移植广泛开展，血管移植对于流入及流出道的重建不可或缺；在实体肿瘤根治术中，若肿瘤侵犯血管，往往需要切除受侵血管并进行重建，以提高患者术后无瘤生存率。

目前，人工血管是临床应用最为广泛的血管替代物，按材质可分为合成血管、生物血管、表面改性人工血管和支架型人工血管。其中，合成人工血管最为常用，由各种惰性高分子材料制成，如涤纶、膨体聚四氟乙烯和聚氨酯人工血管，其分子具有高度晶体化和疏水性，能阻止多聚体水解。然而，人工血管存在明显的局限性，由于缺乏生物活性，无具有抗凝功能的内皮细胞层，移植后血管破裂和血栓的发生率较高，远期通畅率低，限制了其在临床上的广泛应用。

相比之下，低温保存的血管展现出独特的优势。随着低温生物学的快速发展，低温保存设备不断更新，高效低毒的低温保存液得以开发，降温、复温模式持续改进，这一系列进展有效地保存了血管的生物活性和管壁机械强度，使得低温保存血管的应用前景更为广阔。目前，低温保存的人体血管已广泛应用于临床，上世纪80年代就出现了专门经营低温保存血管的公司。但国内对于低温保存血管的研究起步较晚，临床应用相对较少。

当前，对于低温保存血管的研究大多仅局限于一次冻存。然而在实际临床工作中，医生常常无法充分利用一份复温后的血管，若将剩余部分丢弃，无疑是对宝贵血管资源的极大浪费。因此，探究将剩余血管再次冻存后，复温时其细胞活性、机械性能等方面的变化情况，以及是否具备临床应用价值，成为了亟待研究的重要课题。对二次冻存血管的生物与机械性能进行考察，不仅有助于提高血管资源的利用率，还能进一步深化我们对血管冻存损害的病理改变与机制的认识，为血管保存技术的发展提供更为坚实的理论基础，对推动临床血管移植治疗的进步具有重要意义。

1.2国内外研究现状

在血管保存领域，低温保存技术凭借其能有效维持血管生物活性和机械强度的优势，成为了研究的焦点。早在1938年，Leopold就尝试用冷冻于-20℃的血管培养血管内皮细胞，开启了血管低温保存研究的先河。1948年，Polge等发现甘油具有冷冻保护作用，使得深低温保存血管取得了初步成功。随后，1956年Lovelock等建议用二甲基亚砜（DMSO）代替甘油作冷冻保护剂，因其具有更好的防冻作用，此后DMSO成为了血管深低温保存中广泛使用的冷冻保护剂。

在国内，相关研究起步相对较晚，但近年来也取得了显著的进展。中国医科大学附属第一医院的刘婷婷、程颖等人进行了人动脉的低温-深低温序贯保存研究。他们取人的髂动脉和脾动脉，先在4℃UW液中分别保存不同时长，随后将部分血管继续于-80℃下深低温冻存4周，复温后进行相关检测。结果表明，4℃UW液冷保存人体动脉的安全时限为2周；4℃UW液冷保存1周以内的血管再行-80℃深低温冻存，其细胞代谢活性与组织结构保持良好。

在国外，众多科研团队也在积极探索血管低温保存的最佳方案。部分学者专注于不同低温保存温度对血管保存效果的影响，通过设置一系列低温梯度，观察血管在不同温度下保存后的细胞活性、组织结构完整性等指标的变化，试图找出最适宜的保存温度；还有学者致力于开发新型的低温保存液，通过添加各种营养成分、抗氧化剂等，提高保存液对血管的保护作用；另有学者在降温、复温模式上进行创新，采用程序降温、快速复温等方法，减少冰晶对血管细胞的损伤。

尽管国内外在血管低温保存方面已经取得了诸多成果，但目前的研究大多仅局限于一次冻存。在临床实际应用中，医生常常无法充分利用一份复温后的血管，若将剩余部分丢弃，无疑是对宝贵血管资源的极大浪费。而关于血管二次深低温冻存的研究，目前尚处于空白状态。对二次冻存血管的生物与机械性能进行考察，不仅有助于提高血管资源的利用率，还能进一步深化我们对血管冻存损害的病理改变与机制的认识，为血管保存技术的发展提供更为坚实的理论基础，对推动临床血管移植治疗的进步具有重要意义。

1.3研究目的与创新