无病毒苗的培育.pptVIP

2.1茎尖培养脱毒原理病毒在植物体内的布不均匀，顶端分生组织无病毒或病毒浓度低。在生长点含有病毒数量极少，几乎检测不出病毒传递途径：维管束和胞间连丝在分生区域内无维管束；在胞间连丝中，病毒移动速度慢于不断分裂和活跃的细胞，从而在分生组织中，病毒移动和复制受阻。第30页，共71页，星期日，2025年，2月5日2.2茎尖培养脱毒研究简况1943年：White培养番茄根，发被烟草花叶病毒侵染的番茄根切段的病毒含量不一致，在近根尖的切段低，而在根尖顶端则全部无病毒1948-1949年：Holmes和Masset等发现，由病毒感染的植株，不同部位病毒分布不一致。在老叶和成熟的组织及其器官中含量高，而幼嫩的和未成熟组织及其器官中含量低，在生长点0.1-1mm区域，则几乎不含病毒。1952年：Mores等从感染花叶病毒的大丽花植株分离了茎尖0.25mm大小的分生组织培养获得植株，嫁接在大丽花实生砧木上，经检测为无病毒植株。1955年：Mores以马铃薯为材料，也获得了无病毒种苗已有近100种园艺植物通过茎尖培养方法获得无病毒苗第31页，共71页，星期日，2025年，2月5日2.3茎尖培养获得的无病毒植物植物种类病毒茎尖大小甘薯斑纹花叶病毒1-2缩叶花叶病毒1-2羽毛状花叶病毒0.3-1马铃薯Y病毒1-3X病毒0.2-0.5卷叶病毒1-3G病毒0.2-0.3S病毒0.2大丽菊花叶病毒0.6-1第32页，共71页，星期日，2025年，2月5日茎尖培养获得的无病毒植物（续）植物种类病毒茎尖大小香石竹花叶病毒0.2-0.8百合花叶病毒0.2-1大蒜花叶病毒0.3-1矮牵牛烟草花叶病毒0.1-0.3菊花花叶病毒0.2-草莓各种病毒0.2-1甘蔗花叶病毒0.7-0.8春山芥芜青花叶病毒0.5第33页，共71页，星期日，2025年，2月5日2.4茎尖培养脱毒程序材料的选择取出茎尖培养再生第34页，共71页，星期日，2025年，2月5日2.4.1材料的选择品种要可靠选择高产优质的品种作为脱毒材料名贵稀有的植物良种第35页，共71页，星期日，2025年，2月5日2.4.2茎尖的剥取剥去生长点（锥）外围的幼叶和叶原基，露出圆滑的生长锥。剥取茎尖时：迅速（防污染），准确（防损伤生长锥），用显微镱第36页，共71页，星期日，2025年，2月5日茎尖形状、大小和外围幼叶、叶原基着生方式草莓大蒜兰花青芋山芋香石竹第37页，共71页，星期日，2025年，2月5日第38页，共71页，星期日，2025年，2月5日2.5影响茎尖成活及脱毒效果的因素3（1）茎尖大小大，容易成活，获得植株多，但病毒难以除去P121香石竹不同大小茎尖培养与脱毒率的关系茎尖太大不易脱除病毒康乃馨0.1mm和1mm茎尖脱除病毒的效率分别为66%和10%不同植物脱毒茎尖大小不一，康乃馨、百合、鸢尾、菊花和草莓脱除花叶病时：0.2-1mm大丽花脱除花叶病毒：0.6-1mm柑桔：0.14-0.18mm不同病毒种类要求茎尖大小不一样马铃薯Y病毒和卷叶病毒，脱毒茎尖大小为1-3mmG和X病毒0.2-0.5mm；S病毒0.2mm（2）叶原基有无：有则难于脱毒第39页，共71页，星期日，2025年，2月5日影响茎尖成活及脱毒效果的因素（3）培养基基本培养基生长调节剂：有机物质：碳源：葡萄糖和蔗糖，浓度2%-4%第40页，共71页，星期日，2025年，2月5日3.茎尖微芽嫁接Shoottipgrafting,micrografting将0.1-0.2mm的茎尖作为接穗，在解剖镜下嫁接到试管实生苗上，获得完整植株的操作过程。1975年在柑桔上取得成功，现在苹果、桃、梨上获得成功。第41页，共71页，星期日，2025年，2月5日3.1意义培育无病毒苗解决常规培养不能再生根的问题提早开花结果第42页，共71页，星期日，2025年，2月5日3.2方法田间材料取茎尖种子播种获得黄化苗嫁接消毒取小茎尖培养再生移栽第43页，共71页，星期日，2025年，2月5日图解第44页，共71页，星期日，2025年，2月5日4.种子或胚心胚培养脱毒法脱毒原理：珠心与维管束系统无真接联系成功的实例1969年：美Rangan培养授粉后100天左右的柚、Temple珠心组织，获得无病毒苗1973年：西班牙Sicilia播种带病毒甜橙种子得到避毒系1977年：美Button培养华盛顿脐橙珠心组织获得无病毒苗1979年：西班牙Navarro克