矿质元素对植物的作用级.pptVIP

第1页，共28页，星期日，2025年，2月5日综合实验1矿质元素对植物的作用二、实验意义(一）硝酸还原酶活性的测定硝酸还原酶(NR)是硝酸盐同化中第一个酶，也是限速酶，处于植物氮代谢的关键位置。它与植物吸收利用氮肥有关，对农作物产量和品质有重要影响，因而硝酸还原酶活性被当作植物营养或农田施肥的指标之一，也可作为品种选育的指标之一。第2页，共28页，星期日，2025年，2月5日综合实验1矿质元素对植物的作用二、实验意义（二）植物体内硝态氮含量的测定1、植物体内硝态氮含量可反映土壤氮素供应情况，常作为施肥指标。2、蔬菜类作物特别是叶菜和根菜中常含有大量硝酸盐，在烹调和腌制中可转化为亚硝酸盐而危害健康，故硝酸盐含量又成为蔬菜及其加工品的重要品质指标。第3页，共28页，星期日，2025年，2月5日综合实验1矿质元素对植物的作用三、实验基本原理(一）硝酸还原酶活性的测定硝酸还原酶是一种诱导酶，受到NO3-的诱导，在未供应NO3-之前，细胞中不存在已合成的硝酸还原酶，也找不到编码这种蛋白的mRNA。当供给NO3-数小时后，即有硝酸还原酶的合成。此外，光照、还原性糖以及叶绿体正常功能等也是诱导植物NRmRNA基因表达的重要影响因素。第4页，共28页，星期日，2025年，2月5日综合实验1矿质元素对植物的作用三、实验基本原理(一）硝酸还原酶活性的测定采用真空渗入法使NO3-进入植物组织，并在硝酸还原酶作用下还原为NO2-，产生的亚硝态氮在酸性溶液中与对-氨基苯磺酸形成重氮盐，再与α-萘胺定量生成红色偶氮化合物，生成的红色偶氮化合物在520nm有最大吸收峰，可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。NO3－+NADH+H+——→NO2－+NAD++H2ONRase第5页，共28页，星期日，2025年，2月5日综合实验1矿质元素对植物的作用三、实验基本原理（一）硝酸还原酶活性的测定第6页，共28页，星期日，2025年，2月5日综合实验1矿质元素对植物的作用三、实验基本原理（二）植物体内硝态氮含量的测定在酸性条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，生成的硝基水杨酸在碱性条件下（pH＞12）呈黄色，最大吸收波长为410nm，在一定范围内，其颜色的深浅与含量成正比，可直接比色测定。该方法测定硝态氮含量十分稳定可靠。第7页，共28页，星期日，2025年，2月5日综合实验1矿质元素对植物的作用四、仪器试剂（一）硝酸还原酶活性的测定（309实验室）1、实验组玻璃仪器：(1)50ml三角瓶4个(2)试管4根(3)打孔器2个(4)玻棒2根(5)移液管7根试剂：(1)PH7.5磷酸缓冲液(2)0.2molKNO3(3)1%(w/v)磺胺(4)1%(w/v)α-萘胺(5)蒸馏水第8页，共28页，星期日，2025年，2月5日综合实验1矿质元素对植物的作用四、仪器试剂（一）硝酸还原酶活性的测定（309实验室）2、标准曲线组玻璃仪器：(1)试管7根(2)移液管5根试剂：(1)1%(w/v)磺胺(2)1%(w/v)α-萘胺(3)蒸馏水(4)5ug/mlNaNO2第9页，共28页，星期日，2025年，2月5日综合实验1矿质元素对植物的作用四、仪器试剂（二）植物体内硝态氮含量的测定（310实验室）1、实验组玻璃仪器：(1)试管4根(2)烧杯和漓管(3)25ml容量瓶2个(4)漏斗2个(5)弯颈漏斗2个(6)玻棒2根(7)移液管5根试剂：(1)5%水杨酸－硫酸溶液(2)8%NaOH水溶液(3)蒸馏水第10页，共28页，星期日，2025年，2月5日综合实验1矿质元素对植物的作用四、仪器试剂（二）植物体内硝态氮含量的测定（310实验室）2、标准曲线组玻璃仪器：(1)50ml容量瓶8个(2)试管9根(3)移液管8根试剂：(1)5%水杨酸－硫酸溶液(2)8%NaOH水溶液(3)蒸馏水(4)500mg／LKNO3第11页，共28页，星期日，2025年，2月5日综合实验1矿质元素对植物的作用五、实验材料1、小麦、玉米、棉花、蓖麻、烟草、向日葵等农作物叶片或叶柄；2、黄瓜、茄子、辣椒、豆角、大白菜、萝卜等蔬菜绿叶、心叶、菜心、菜帮等；3、八仙花、红叶石楠、木芙蓉、紫荆、珊瑚树等园林植物叶片或叶柄；4、枫香、木荷、梧桐、泡桐等林木叶片或叶柄。第12页，共28页，星期日，2025年，2月5