2026版高中汉水丑生生物-选3第三章第2节：基因工程的基本操作程序（第2课时）.pptxVIP

3.3.2基因工程操作的基本程序（第2课时）基因工程操作基的本程序

一、目的基因的获取二、基因表达载体的构建三、将目的基因导入受体细胞基因工程操作的基本程序汉水丑生作品（QQ四、目的基因的检测与鉴定

用于______________________或______________________等的基因就是目的基因。目的基因主要是指______________的基因，如与生物抗逆性、优良品质等相关的基因。苏云金杆菌通过产生苏云金杆菌伴胞晶体蛋白（Bt抗虫蛋白），破坏鳞翅目昆虫的_________来杀死棉铃虫。科学家通过实验，将该细菌的“杀虫基因”转到棉花里，让棉花也能产生__________抵抗虫害。这个“杀虫基因”就是培育转基因抗虫棉用到的目的基因——Bt抗虫蛋白基因，简称__________。目的基因改变受体细胞性状获得预期表达产物编码蛋白质消化系统Bt抗虫蛋白Bt基因当Bt抗虫蛋白被分解为多肽后，多肽与害虫肠上皮细胞的_____________结合，导致___________，最后造成害虫死亡。Bt抗虫蛋白只有在某类昆虫肠道的______性环境中才能表现出毒性，而人和牲畜的胃液呈_____性，肠道细胞也没有______________。因此，Bt抗虫蛋白不会对人畜产生上述影响。细胞膜穿孔特异性受体碱酸特异性受体

生物材料人工合成获取目的基因DNAcDNA一定大小范围的DNAPCRmRNA基因组文库cDNA文库基因文库包括限制酶酶切逆转录导入受体菌中保存在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即_____________和从___________中分离。人工合成生物材料基因比较小，核苷酸序列又已知DNA合成仪

基因组文库从细胞中提取DNA细胞基因组DNA质粒质粒酶切DNA连接酶连接限制酶酶切导入细菌中基因组文库克隆提取酶切的DNA片段cDNA文库逆转录逆转录酶酶切的cDNA片段限制酶酶切质粒质粒酶切连接导入细菌中cDNA文库克隆提取基因组DNA限制酶酶切mRNA逆转录得cDNA，酶切拼接质粒，导入细菌中保存为文库基因组文库cDNA文库（部分基因文库）

生物材料人工合成获取目的基因DNAcDNA一定大小范围的DNAPCRmRNA基因组文库cDNA文库基因文库包括限制酶酶切逆转录导入受体菌中保存在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即_____________和从___________中分离。人工合成生物材料基因比较小，核苷酸序列又已知DNA合成仪

一、目的基因的获取二、基因表达载体的构建三、将目的基因导入受体细胞基因工程操作的基本程序汉水丑生作品（QQ四、目的基因的检测与鉴定

获取了足够量的目的基因（Bt基因）后，下一步就是要让目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代；同时，使Bt基因能够表达和发挥作用，这就需要构建基因表达载体。这一步是培育转基因抗虫棉的核心工作。

pBI121载体多克隆位点是目的基因插入部位，一般具有多种限制酶的酶切位点RNA聚合酶识别位点，启动转录。具有物种和组织细胞特异性可转移至细胞的染色体DNA上抗卡那霉素基因，用于重组质粒的筛选T-DNAT-DNA动子启标R记基因Kan多克隆位点复制原点终子止转录终止信号

启动子位于基因上游，是RNA聚合酶识别和结合位点，驱动基因转录。组成型启动子（一直干活）组织特异性启动子（特定组织中干活）诱导性启动子（特定诱导物下干活）终止子位于基因下游，提供转录终止的信号。

目的基因限制酶切割位点构建程序：先用同种限制酶或能产生相同末端的限制酶（同尾酶）切割载体和含有目的基因的片段，再用DNA连接酶将目的基因片段拼接到载体上，形成重组DNA分子标记基因启动子限制酶切割位点终止子复制原点限制酶限制酶DNA连接酶

一、目的基因的获取二、基因表达载体的构建三、将目的基因导入受体细胞基因工程操作的基本程序汉水丑生作品（QQ四、目的基因的检测与鉴定

转化：是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。

植物花粉在柱头上萌发后，花粉管要穿过花柱直通胚囊。花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管还未愈合前，剪去柱头，然后滴加纯化的表达载体，使目的基因借助____________进入受体细胞。我国的________________就是用此种方法获得的。花粉管通道转基因抗虫棉第三步：将目的基因导入植物细胞（花粉管通道法）

Ti质粒T-DNA目的基因构建表达载体含目的基因的重组Ti质粒转入农杆菌含重组Ti质粒的农杆菌导入植物