紫外分光度计培训课件.pptx

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紫外分光度计培训课件

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目录

01.

紫外分光度计概述

03.

基本操作流程

05.

常见问题及解决

02.

操作前的准备

06.

高级功能与技巧

04.

数据处理与分析

紫外分光度计概述

PARTONE

工作原理介绍

光的吸收与物质的关系

紫外分光度计通过测量物质对特定波长紫外光的吸收程度来分析物质浓度。

单色光源的使用

仪器使用单色光源发射紫外光,确保测量的准确性和重复性。

检测器的作用

检测器负责接收穿过样品的光,并将其转换为电信号,用于计算吸光度。

设备组成结构

紫外分光度计的光源组件通常包括氢灯或氘灯,提供稳定的紫外光源。

光源组件

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03

04

单色器是分光度计的核心部件,负责将光源发出的光分解成单色光。

单色器

检测器用于接收经过样品吸收后的光信号,并将其转换为电信号进行分析。

检测器

样品池是放置待测样品的容器,通常由石英制成,以透过紫外光。

样品池

应用领域概述

紫外分光度计广泛应用于化学分析领域,用于测定溶液中特定物质的浓度。

化学分析

紫外分光度计在环境监测中用于检测水和空气样本中的污染物含量。

环境监测

在生物医学领域,紫外分光度计用于蛋白质、核酸等生物大分子的定量分析。

生物医学研究

食品工业中,紫外分光度计用于检测食品中的添加剂、维生素等成分的含量。

食品工业

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操作前的准备

PARTTWO

设备检查与校准

确保设备电源线无损坏,插座接触良好,电源开关处于关闭状态,避免操作时发生危险。

检查紫外分光度计的电源连接

通过测量已知浓度的标准溶液,验证检测器的响应度是否在正常范围内,保证数据的可靠性。

检查检测器的响应度

使用标准光源或校准灯对仪器进行波长校准,确保测量结果的准确性,如汞灯的546.1nm谱线。

校准紫外分光度计的波长准确性

检查并清洁样品室,确保无尘埃或残留物,避免对测量结果产生干扰,影响实验准确性。

确认样品室的清洁度

样品制备方法

根据样品的性质选择适当的溶剂,如水、乙醇或甲醇,以确保样品在溶剂中稳定且可溶解。

选择合适的溶剂

01

对于高浓度样品,需要进行适当稀释,以确保吸光度在仪器的线性范围内,获得准确的测量结果。

样品的稀释

02

使用滤膜或滤纸去除样品中的悬浮颗粒和杂质,防止对紫外分光度计的光路造成污染或干扰。

过滤去除杂质

03

安全操作规程

确保设备电源线无损坏,插座稳固,避免触电或设备损坏。

检查紫外分光度计的电源连接

在操作前确认所有样品无毒、无腐蚀性,穿戴适当的防护装备。

检查样品是否安全无害

检查紫外分光度计的通风扇是否正常工作,以防止有害气体积聚。

确认仪器的通风系统正常

基本操作流程

PARTTHREE

开机与关机步骤

确保紫外分光度计电源线连接正确,检查仪器外部无明显损坏。

开机前的准备

按下仪器的电源按钮,等待系统自检完成,屏幕显示正常后方可使用。

开机步骤

完成测量后,先关闭光源,再按电源键关闭仪器,最后拔掉电源线。

关机步骤

关机后应等待仪器冷却,避免立即移动或存放,以防损坏仪器内部组件。

注意事项

测量模式选择

在紫外分光度计中,吸光度模式用于测量样品对特定波长光的吸收程度,是基础测量方式。

选择吸光度模式

双波长测量模式通过同时测量两个不同波长的吸光度,可以消除背景干扰,提高测量准确性。

双波长测量

透射率模式测量光通过样品后的强度,常用于溶液浓度的快速测定和质量控制。

透射率模式设定

数据读取与记录

在开始读取数据前,确保紫外分光度计已经校准,以保证数据的准确性。

校准仪器

01

测量样品后,记录每个样品的吸光度值,这是分析样品浓度的关键数据。

记录吸光度值

02

使用已知浓度的标准溶液绘制标准曲线,以便将吸光度值转换为浓度值。

绘制标准曲线

03

将所有测量数据进行备份,并妥善存储,以备后续分析或验证使用。

数据备份与存储

04

数据处理与分析

PARTFOUR

校正曲线的绘制

根据样品的特性和实验要求,选择线性或非线性校正方法,如标准添加法或标准曲线法。

选择合适的校正方法

准备一系列已知浓度的标准溶液,用于绘制校正曲线,确保数据的准确性和可靠性。

制备标准溶液系列

使用紫外分光度计对标准溶液进行吸光度测量,获取不同浓度下的吸光度值。

进行吸光度测量

利用最小二乘法等统计方法对吸光度数据进行线性拟合,得到校正曲线的直线方程。

数据点的线性拟合

通过测量未知样品的吸光度,并利用校正曲线计算其浓度,验证曲线的准确性和适用性。

验证校正曲线的准确性

浓度计算方法

利用朗伯-比尔定律,通过吸光度与溶液浓度成正比的关系,计算未知溶液的浓度。

朗伯-比尔定律应用

通过绘制标准溶液的吸光度与浓度关系曲线,利用样品吸光度在曲线上找到对应浓度值。

标准曲线法

对于多组分混合物,使用三线性方程法通过解联立方程组

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