第十四章维生素类药物的分析.pptVIP

四、含量测定正相高效液相色谱法ChP含量以单位表示每单位相当于维生素D0.025μg注意：计算的是维生素D及前维生素D经折算成维生素D的总量第95页，共140页，星期日，2025年，2月5日测定在半暗室及避免氧化的情况下进行第一法：无干扰杂质第二法：有VA及其他杂质干扰第三法：用第二法时，前VD峰受杂质干扰仅VD峰可分离第96页，共140页，星期日，2025年，2月5日第一法内标物：邻苯二甲酸二甲酯色谱条件及系统适用性试验：填充剂：硅胶流动相：正己烷-正戊醇（997：3）检测波长：254nm无干扰杂质第97页，共140页，星期日，2025年，2月5日维生素D3△光照前维生素D3反式维生素D3维生素D3速甾醇D3与维生素D3的比保留时间分离度＞1.0＞1.0溶液组成先后进样5次，维生素D3峰面积的RSD≤2.0%0.50.61.01.1第98页，共140页，星期日，2025年，2月5日校正因子测定：维生素D的校正因子:f1=Asmi/Aims前维生素D折算成维生素D的校正因子:f2=（Asmr-f1msAr1）/（Ar2ms）含量测定：计算VD及前VD折算成维生素D的总量mi=（f1Ai1+f2Ai2）ms/As第99页，共140页，星期日，2025年，2月5日第二法第一步：皂化提取供试品OH-加热回流冷却乙醚提取乙醚提取液挥干乙醚残渣甲醇溶解供试溶液A有VA及其他杂质干扰第100页，共140页，星期日，2025年，2月5日讨论非定量完成，但一定条件下，生成硫色素与维B1浓度成正比，因此可用于含量测定。专属性强，不受氧化产物影响。氧化剂除铁氰化钾外，可使用氯化汞，溴化氰。第63页，共140页，星期日，2025年，2月5日掌握：维生素C的结构特征鉴别检查碘量法测定含量的方法第三节维生素C的分析第64页，共140页，星期日，2025年，2月5日L－抗坏血酸一、结构与性质（一）结构二烯醇：强还原性内酯：碱性下水解两个手性碳(C4,C5)第65页，共140页，星期日，2025年，2月5日1.溶解性易溶于水（二）性质2.酸性C3上的羟基受共轭效应的影响，酸性较强，pKa=4.17C2上的羟基因邻位羰基的影响，酸性较弱，pKa=11.57所以抗坏血酸一般表现为一元酸，能与NaHCO3作用生成钠盐。第66页，共140页，星期日，2025年，2月5日二烯醇结构二酮基结构二烯醇结构3.还原性从VitC结构看，与糖类化合物十分相似。其结构中的二烯醇结构使其化学性质非常活泼，可以反复接受和释放质子，具有既易氧化有能还原的可逆性质。氧化为去氢抗坏血酸，加氢又复变为抗坏血酸。在pH7以上，受碱的催化作用，很快继续水解为二酮古洛糖酸盐，在强酸性溶液中也能进行此反应。第67页，共140页，星期日，2025年，2月5日有活性有活性无活性L－抗坏血酸L－去氢抗坏血酸L－二酮古洛糖酸H+OH-第68页，共140页，星期日，2025年，2月5日D-抗坏血酸与L-抗坏血酸理化性质相似，常作为食品中的抗氧化剂，但其生物活性只有L-抗坏血酸的5％。手性C（C4、C5）4.旋光性**维生素C（L-抗坏血酸）D-抗坏血酸第69页，共140页，星期日，2025年，2月5日与碱反应5.水解反应第70页，共140页，星期日，2025年，2月5日糖类的显色反应结构与糖类相似6.具糖的性质H+Δ脱水糠醛糠醛衍生物酚类显色VitCH+脱水糠醛吡咯蓝色50℃7.UV特征OH-H+λmax265nmλmax243nm第71页，共140页，星期日，2025年，2月5日利用还原性：与氧化剂的反应二、鉴别试验第72页，共140页，星期日，2025年，2月5日（一）与AgNO3反应（二）与2，6-二氯靛酚反应(ChP2010)氧化型玫瑰红色还原型蓝色(ChP2010)AgNO3VitC银镜2，6-二氯靛酚VitC无色第73页，共140页，星期日，2025年，2月5日（玫瑰色）（无色）第74页，共140页，星期日，2025年，2月5日与碱性酒石酸铜反应USP与KMnO4反应（三）与其他氧化剂反应酸性酒石酸铜VitCCu2O↓红KMnO4VitCMn2+（四）糖类的反应50℃吡咯VitC三氯醋酸或盐