霉菌的分离纯化和鉴定.pptVIP

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Enterotube系统该装置可做下列15种试验:葡萄糖产酸产气、赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶、硫化氢、靛基质、乳糖和卫矛醇发酵、苯丙氨酸脱氨酶、尿素酶和柠檬酸盐、侧金盏花醇、阿拉伯糖、山梨醇和V.P试验等试验。查阅专门设计的结果判定表。*现在是30页\一共有43页\编辑于星期日㈡快速、自动化微生物检测仪器和设备微生物快速检测仪器通用仪器:气相色谱仪、高压液相色谱仪、质谱仪、X射线衍射仪、核磁共振波谱仪、激光拉曼光谱仪及激光显微镜、流式细胞仪等;专用或首先使用的仪器:阻抗测定仪、放射测量仪、微量量热计、生物发光测定仪、药敏测定仪、自动微生物检测仪;*现在是31页\一共有43页\编辑于星期日霉菌的分离、纯化与鉴定现在是1页\一共有43页\编辑于星期日怎样鉴定微生物呢?微生物鉴定主要是要回答两个问题:一、它是不是某一种菌?——针对性;——规范的检测鉴定方法;——如:致病菌检测;二、它到底是什么菌?——常规鉴定;——大致的工作步骤;——如:筛菌,潜在用途;*现在是2页\一共有43页\编辑于星期日分离资源微生物的基本原则一、微生物可谓无处不在,获得什么样的微生物,取决于分离的目的:特定类群微生物的分离(定向分离);获取新资源(分离未知菌);分离“混合菌”(完成某种功能的一组菌);二、分离的基本原则是:获得目的菌;排除非目的菌;*现在是3页\一共有43页\编辑于星期日总思路流程采样预处理初筛复筛形态学观察生理生化实验分子生物学方法1、微生物资源的分布;2、样品的采集:2h、4℃;1、目的菌的富集培养;2、减少非目的菌;3、目的菌的充分释放;1、培养基设计原则;2、分离方法介绍;3、培养条件;1、获得纯培养;2、选择目的菌株;1、霉菌简介;2、菌落形态;3、霉菌制片观察;18SrRNA1、真菌的系统发育谱;2、微生物快速鉴定技术;*现在是4页\一共有43页\编辑于星期日一、微生物资源的分布及样本的采集土壤环境:每年春季或旱雨季之交,一般在3-5月为佳;通常采集10-40cm深处的土样;若要分离放线菌和真菌,土样应放到无菌牛皮纸袋中,一般不放在瓶子或塑料袋中;如果要分离细菌,最好要保湿;海洋环境及湿地:0.5μm的滤膜过滤水样,以增加出菌率;Ekmann型采泥器或重锤式取样器采集;样品装入无菌瓶内,不能密封,在3h内用于实验;极端环境:尽量存放在与采样环境相当的条件下至菌种分离;植物和动物:确保样品的完整性,迅速对植物切口进行消毒,并用石蜡封住以防外来菌种入侵,用无菌装置带回;如动物粪便的采集应在动物排便后马上收集其中间部分,避免外源污染,置于无菌袋内;*现在是5页\一共有43页\编辑于星期日二、样品的预处理1、目的菌的富集培养根据目的菌的生理特性,加入其所需要的营养物质及微量成分进行诱导增殖,增菌;设计特定的有利于待分离菌株生长的环境。——为了分离铁硫杆菌,可将样品加硫磺后培养;——为了分离分解纤维素或角蛋白等的酶产生菌,可以将样品与高浓度的纤维素或角蛋白(适当加入其他成分)在适当温度下保湿培养一段时间,再进行分离;2、减少非目的菌——若目的菌耐干燥,则可通过干燥减少非目的菌;——若要分离高温菌,可在特定高温下震荡培养若干时间,以减少非耐热菌的干扰;——加入非目的菌的抑制剂;3、目的菌的充分释放——使目的菌与样品基质分离:加入活化剂或乳化剂;震荡及超声波处理,DDC技术;酶法或研磨等组织破碎法;*现在是6页\一共有43页\编辑于星期日三、初筛设计选择性培养基,稀释涂布,挑选目标菌株。1、培养基设计原则合适的营养物质及浓度配比

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