1.2基因工程的基本操作程序市赛课金.pptxVIP

1.三种工具是？

2.两种末端类型？

3.根据DNA连接酶的来源，将其分为哪两类？

4.运输车的种类？;1.2基因工程的基本操作程序;基因工程的基本操作程序;目的基因重要是指______________________;目的基因重要是指______________________;一、目的基因的获取;基因文库：;①基因组文库;目的基因的mRNA;两种基因文库除了基因的种类、数量，尚有什么区别？;;原核细胞的基因;原核细胞与真核细胞基因构造的比较;;思考1.反转录法得到的目的基因中有非编码区吗？有内含子吗？

思考2.在发育某一段能得到某生物全部基因对应的RNA吗？

思考3.真核生物基因组文库中获取的DNA转入原核生物细胞中能正常体现吗？;基因组文库和CDNA文库的区别;根据：目的基因的有关信息。

如：根据基因的核苷酸序列

基因的功效

基因在染色体上的位置

基因的转录产物mRNA

基因翻译产物蛋白质等特性;多聚酶链式反映;变性：加热至90～95℃双链DNA解链成为单链

退火（复性）：冷却至55～60℃，引物与单链对应互补序列结合

延伸：加热至70～75℃，在DNA聚合酶作用下延伸，合成互补的新DNA;条件：______________________________________、

_______________、___________(启动作用)、___________;过程1.目的基因受热变性，解链（高温变性）

过程2.引物与单链互补结合（退火）复性（低温复性）

过程3.合成链在DNA聚合酶作用下进行延伸（中温延伸）

过程4.多次重复;运用PCR技术扩增目的基因;a、DNA变性（90℃-95℃）：双链DNA模板

在热作用下，断裂，形成_______;（三）DNA合成仪用化学办法直接人工合成;;获取目的基因时一定要构建基因文库？;寻根问底：将全部DNA直接导入受体细胞不是更简便吗？如果这样做，成果会如何？;1、基因体现载体的作用;（1）生物之间进行基因交流，只有使用受体生物本身基因的启动子才干比较有助于基因的体现；

（2）通过cDNA文库获得的目的基因没有启动子、终止子，只将编码序列导入受体生物中无法正常转录。

（3）目的基因与否导入受体生物中需要有筛选标记。;2.基因体现载体的构成：;启动子：一段有特殊构造的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位。;;转化——;1、将目的基因导入植物细胞;（2）基因枪法;（3）花粉通道法;2、将目的基因导入动物细胞;3、将目的基因导入微生物细胞;运用大肠杆菌能够生产出人的胰岛素，联系前面有关细胞器功效的知识，结合基因工程操作程序的基本思路，思考一下，若要生产人的糖蛋白，能够用大肠杆菌吗？;检测;1、检测转基因生物染色体的DNA上与否插入了目的基因;;（二）鉴定（个体生物学水平）;;基因工程操作流程图;A;4.β-珠蛋白是动物血红蛋白的重要构成成分。当它的成分异常时，动物有可能患某种疾病，如镰刀形细胞贫血症。如果让你用基因工程的办法，使大肠杆菌生产出鼠的β-珠蛋白，想一想，应如何进行设计？;（1）从小鼠中克隆出β-珠蛋白基因的编码序列（cDNA）。

（2）将cDNA前接上在大肠杆菌中能够合用的启动子，另外加上抗四环素的基因，构建成一种体现载体。

（3）将体现载体导入无四环素抗性的大肠杆菌中，然后在含有四环素的培养基上培养大肠杆菌。如果体现载体未进入大肠杆菌中，大肠杆菌会因不含有抗四环素基因而死掉；如果培养基上长出大肠杆菌菌落，则表明β-珠蛋白基因已进入其中。

（4）培养进入了β-珠蛋白基因的大肠杆菌，收集菌体，破碎后从中提取β-珠蛋白。;1）不属于质粒被选为基因运载体的理由是

A、能复制

B、有多个限制酶切点

C、含有标记基因

D、它是环状DNA;2）有关基因工程的叙述对的的是

A、限制酶只在获得目的基因时才用

B、重组质粒的形成在细胞内完毕

C、质粒都可作为运载体

D、蛋白质的构造可为合成目的基因提供资料;4.下表有关基因工程中有关基因操作

的名词及对应的内容，对的的组合是 ;5.细菌的质粒分子带有一种抗菌素抗性基因，该抗性基因在基因工程中的重要作用是

A．提高受体细胞在自然环境中的耐药性

B．有助于对目的基因与否导入进行检测

C．增加质粒分子的分子量

D．便于与外源基因连接;6.哪项不是基因体现载体的构成部分()

A.启动子B.终止密码

C.标记基因D.目的基因

7.下列哪项不