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计算1.LD50的计算按综合计算法公式计算2.计算logLD50的标准误S3.计算95%置信区界(FL)上述公式中:Xm为最大死亡率组剂量对数;i为组距(相邻两组剂量比值的对数);∑P为各组死亡率总和(用小数表示);X50为logLD50;Xi相邻对数剂量差。第28页,共55页,星期日,2025年,2月5日如果试验结果最高死亡率在80~100%之间,最低死亡率在20~0%之间,可用下列公式求得校正值:LD50=log-1[Xm-i(∑p-(3-Pm-Pn)/4]式中:Pm—最高死亡量组Pn—最低死亡量组第29页,共55页,星期日,2025年,2月5日实验五肝脏损伤对药物作用的影响实验目的通过实验,观察肝损伤后对药物作用的影响。实验目的肝脏是药物代谢的主要器官,而药物的代谢主要靠酶的催化。在肝细胞内有专门催化药物等外源性化学物质代谢的微粒体酶,简称药酶。四氯化碳是一种对肝细胞有严重毒害作用的化学物质,可引起中毒性肝炎,使肝脏对药物的代谢能力降低。本实验用四氯化碳损害小白鼠的肝脏,使肝药酶活性受到抑制,从而减缓对硫喷妥钠的代谢,使麻醉时间延长。第30页,共55页,星期日,2025年,2月5日实验仪器、设备仪器:注射器,针头,天平,鼠笼。药物:四氯化碳、硫喷妥钠实验内容给健康小白鼠注射四氯化碳(0.1mL/10g),造成肝损伤,后用0.3%硫喷妥钠注射(0.15mL/10g),与健康小白鼠对照,比较它们麻醉出现及维持的时间的不同;解剖所有小白鼠,分别观察它们肝和肾的病理变化,并与健康小白鼠比较。第31页,共55页,星期日,2025年,2月5日实验记录肝脏损伤对药物作用的影响鼠号体重(g)硫喷妥钠剂量(mL)注射时间麻醉开始时间麻醉维持时间健康鼠肝损鼠注意事项“麻醉开始时间“为小鼠从腹腔注射硫喷妥钠溶液后至翻正反射消失时间;“麻醉消失时间”为从翻正反射消失至翻正反射恢复的时间。第32页,共55页,星期日,2025年,2月5日实验六药物敏感性实验学习内容药物敏感实验——纸片法定量药敏实验——试管二倍稀释法学习要求掌握两种药物敏感实验的原理、方法及注意事项。第33页,共55页,星期日,2025年,2月5日抗菌药物敏感性试验(AST,简称药敏试验):用于测试抗菌药物在体外对病原微生物有无抑制作用。常用最低抑菌浓度(MIC)表示,即体外能够抑制细菌生长的最低药物浓度。通常根据MIC结合常用剂量时体内该药所能达到的血药浓度,划定细菌对各种抗生素敏感或耐药的界限,给出S(敏感)、I(中介)、R(耐药)等定性的结果,方便临床用药。检测病原菌对各种抗生素的敏感性,指导临床合理用药。用于流行病学调查及院内感染的监控,控制和预防耐药菌株的流行。为经验用药提供参考依据。方法:扩散法(纸片法)、稀释法(有琼脂稀释法和液体稀释法)第34页,共55页,星期日,2025年,2月5日药敏纸片的人工制作定性滤纸用打孔器打成直径6mm的圆片,每100片放入一小瓶中,160℃干热灭菌1---2小时,或用高压灭菌(6.8kg30min)后在60℃条件下烘干。(此应提前做好)抗菌药物的浓度(指有效药物浓度)
青霉素200U/ml其它抗菌药物1000ug/ml
磺胺类药物10mg/ml中草药制剂1g/ml
庆大霉素4万单位/ml,稀释为1000单位/ml。(临床上可按照药品使用说明书,如上面标明5克本品可拌50千克饲料,其换算方法为l克本品可拌10千克饲料,也就是1克本品拌l0000克饲料,相当于药品浓度为l克本品加l0000毫升蒸馏水。)第35页,共55页,星期日,2025年,2月5日用无菌操作法将欲测的抗菌药物溶液1ml,加入100片纸片中,置冰箱内1—2小时,用下列方法烘干:培养皿烘干法:将浸有抗菌药液的纸片摊平在培养皿中,于37℃的温箱内保持2--3小时即可干燥,或放在无菌室内过夜干燥。将制好的各种药物纸片装入无菌小瓶中,置冰箱内保存备用。并用标准敏感菌株做敏感性实验,记录抑菌环的直径。干燥的药敏纸片可保存6个月。使用前用标准的敏感菌株做药物敏感实验,若抑菌环比原来小,则表明该纸片已失效。第36页,共55页,星期日,2025年,2月5日纸片法每组约7-8个平皿(每人1个),每个平皿约20毫升琼脂培养基,即约200ml。按照每组500毫升琼脂培养基、100毫升肉汤培养基准备。每平皿约4张纸片,每班约240张以上。将琼脂培养基熔融后,每个平皿倒入约20毫升,晾干后,用玻棒蘸含菌棉球(玻棒、棉球均事先消毒)涂抹均匀后晾干。用
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