激光扫描共聚焦显微镜.pptxVIP

生物物理教研室陈丽娜

激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）

授课内容一、LSCM的发展与现状二、LSCM的成像原理及组成三、LSCM的使用步骤四、LSCM的基本功能五、LSCM在生物医学领域中的应用

1957年，MarvinMinsky提出共聚焦原理；1978年，Brandengoff在高数值孔径透镜装置上改装成功具有高清晰度的共聚焦显微镜；1982年，BIO-RAD公司第一个推出商品化激光扫描共聚焦显微镜；1985年，WijnaendtsVanResandt发表了第一篇有关激光扫描共聚焦显微镜在生物学中应用的文章；1987年，发展成现在通常意义上的第一代激光扫描共聚焦显微镜。激光扫描共聚焦显微镜发展与现状

仪器名称生产商型号BD高通量活细胞共聚焦分析系统400系列美国BD公司Pathway415、Pathway435BD高通量活细胞共聚焦分析系统800系列美国BD公司800系列BD全光谱活细胞共聚焦高速扫描系统美国BD公司CARVⅡ尼康共焦显微镜尼康（Nikon)C1共焦激光扫描显微镜徕卡仪器有限公司LeicaTCS-SP2OLYMPUS激光共聚焦显微镜OLYMPUSFV300OLYMPUS激光共聚焦显微镜OLYMPUSFV1000NIKON共聚焦显微镜尼康（nikon)尼康（nikon）C1-plusUltraView?高速扫描型激光共聚集系统PerkinElmerUltraView?高通量共聚焦显徽细胞图像分析测定系统GEHealthcareINCellAnalyzer3000时间分辨激光共聚焦显微成像系统德国耶莱公司TauMap德国ZEISS激光共聚焦显微镜德国ZEISSLSM510SYSTEM德国ZEISS激光共聚焦显微镜德国ZEISSLSM510PASCALSYSTEM

FluoView?FV1000共聚焦显微镜美国Meridian公司的ACASuLTIMA312为同类仪器中档次最高、功能最全的精密仪器。它能达到每秒120幅画面的高速扫描激光共聚焦观察，可提供实时，真彩色的激光共聚焦原色图象。FV1000系统完美地整合了两套相互独立的扫描模块在一套系统内，在一束激光进行实验刺激的同时，另一束激光实时地对样品进行扫描，从而记录完整的动态变化过程。BIO-RAD公司第七代Radiance?2100型激光扫描共聚焦显微镜是全世界唯一无需人工调整的激光扫描共聚焦扫描显微镜

软件系统1）激光光源2）计算机系统3）共聚焦系统4）光学探测系统5）图像分辨率6）扫描方式激光扫描共聚焦显微镜硬件和软件系统硬件系统1）、ImageAnalyze2）、RatioAnalysis和Kinetics3）、Cell–CellCommunicationandFRAP4）、CellList5）、CellSorting6）、ConfocalImaging

Mitoticcells,multiplefluorescence(NCIMaryland)

二、激光扫描共聚焦显微镜成像原理及组成激光扫描共聚焦显微镜（LaserScanningConfocalMicroscopy，简称LSCM）是近代生物医学图象仪器的最重要发展之一，它是在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置，使用紫外光或可见光激发荧光探针，利用计算机进行图象处理，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象，以及在亚细胞水平上观察诸如Ca2+、pH值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化等。已广泛应用于细胞生物学、生理学、病理学、解剖学、胚胎学、免疫学和神经生物学等领域，对生物样品进行定性、定量、定时和定位研究具有很大的优越性，成为这些领域新一代强有力的研究工具。

01荧光显微镜系统及样品台02激光光源03扫描器04图象存储及处理系统05LSCM各部分相互关系示意图06计算机控制系统07控制1、LSCM的基本结构

计算机数字图象处理分析系统共聚焦显微镜与普通光学显微镜的比较普通光学显微镜场光源干扰激光扫描共聚焦显微镜激光光源共轭聚焦原理和装置照相

LightMicroscopyAC.elegansEmbryoGatpro-nucleimeetingGstage(beforedividinginto2-cellembryo)DifferentialInterferenceContrast

(DIC;Nomarski)LaserScanningConfocalMicroscopy(LSCM)MultiphotonFluorescenceExcitationMicroscopy(