化学农药环境安全评价试验准则 第11部分：家蚕急性毒性试验.pdfVIP

化学农药环境安全评价试验准则

第11部分：家蚕急性毒性试验

警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的安全问题。

使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。

1范围

本文件规定了喷雾法和熏蒸法测定化学农药家蚕急性毒性的试验条件、试剂或材料、仪器设备、样

品、试验步骤、试验数据处理、质量控制以及试验报告等的基本要求。

本文件适用于为化学农药登记而进行的家蚕急性毒性试验。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

NY/T2882.5农药登记环境风险评估指南第5部分：家蚕

NY/T4195.4农药登记环境影响试验生物试材培养第4部分：家蚕

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

半致死浓度medianlethalconcentration

在喷雾法毒性试验中，引起50%受试家蚕死亡时桑叶中的被试物浓度，用LC50表示。

注：单位为毫克被试物每千克桑叶（mg被试物/kg桑叶）或毫克有效成分每千克桑叶（mga.i./kg桑叶）。

4原理

4.1喷雾法毒性试验

以喷雾处理后的桑叶饲喂二龄起蚕，观察24h、48h、72h、96h后受试家蚕的中毒症状及死亡情

况，试验结束后对数据进行统计分析，求出LC50及其95%置信区间。

4.2熏蒸法毒性试验

针对卫生用药模拟室内施药条件进行的试验，应在满足试验要求的熏蒸试验装置或熏蒸室内进行。

熏蒸试验装置或熏蒸室应在满足试验要求的前提下，按照推荐用药量设计相关参数。被试物在试验装置

或熏蒸室中定量燃烧（或电加热），从熏蒸开始，按0.5h、2h、4h、6h、8h观察记录熏蒸试验装置

内家蚕的毒性反应症状，8h后将试验装置内的家蚕取出，在家蚕常规饲养条件下继续观察24h及48h

的家蚕死亡情况。

5试验条件

试验温度为（25±2）℃，相对湿度为70%～85%，光照周期（光暗比）应为16h:8h。

6试剂或材料

6.1试剂

除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。

6.1.1丙酮（CHOCAS号：67-64-1）、二甲基甲酰胺（CHNOCAS号：68-12-2）、二甲基亚砜

3637

（CHOSCAS号：67-68-5）等有机溶剂。

26

6.1.2乐果（CHNOPSCAS号：60-51-5）。

51232

6.1.3琼脂（CAS号：9002-18-0）。

6.2供试生物

选用菁松×皓月等有代表性的家蚕(Bombyxmori)品种，按照NY/T4195.4的要求培养。以二龄起蚕作

为受试家蚕。

6.3供试桑叶

采集蚕桑树（Morusalba）顶端新鲜、清洁、无污染的嫩叶用于试验。未使用的桑叶可用保鲜膜包

裹叶柄，放入密封袋中冷藏保存，保存时间最长1周。

7仪器设备

喷雾设备（应喷雾均匀，可定量计算）；

人工气候室；

恒温恒湿培养箱；

分析天平（感量0.0001g）；

培养皿（宜选用直径20cm）；

熏蒸箱等。

8样品

被试物

农药原（母）药或制剂。试验开始前，应了解被试物的以下信息：

a)水中溶解度；

b)有机溶剂中的溶解度；

c)代表性制剂的田间推荐施药量及其使用次数等。

参比物

宜选用乐果原药为参比物。

9试验步骤

喷雾法

9.1.1预试验

按正式试验的条件，以较大的间距设置4个～5个处理组，以确定正式试验的浓度范围。

9.1.2正式试验

9.1.2.1试验设计

根据预试验确定的浓度范围按一定比例间距（几何级差≤2.2）设置5个～7个浓度组，并设空白对

照，被试物