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枯草芽孢杆菌Est13酶在酵母中的表达优化及降解效能研究.docxVIP

枯草芽孢杆菌Est13酶在酵母中的表达优化及降解效能研究.docx

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    枯草芽孢杆菌Est13酶在酵母中的表达优化及降解效能研究

    目录

    枯草芽孢杆菌Est13酶在酵母中的表达优化及降解效能研究（1）．．．3

    一、前言．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

    二、文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

    枯草芽孢杆菌Est13酶．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

    枯草芽孢杆菌Est13酶在酵母中的表达．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

    枯草芽胞杆菌Est13酶在酵母中的降解效能．．．．．．．．．．．．．．．．．10

    （1）枯草芽胞杆菌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

    （2）枯草芽胞杆菌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

    （3）枯草芽胞杆菌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

    三、枯草芽孢杆菌Est13酶在酵母中的表达优化．．．．．．．．．．．．．．．．．21

    酵母菌株的选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

    表达载体的构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

    枯草芽胞杆菌Est13酶表达条件的优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

    （1）发酵温度的优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

    （2）体重量的优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

    四、枯草芽孢杆菌Est13酶在酵母中的降解效能研究．．．．．．．．．．．．．44

    枯草芽孢杆菌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

    （1）枯草芽孢杆菌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

    （2）枯草芽孢杆菌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

    （3）枯草芽孢杆菌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52

    枯草芽孢杆菌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54

    （1）枯草芽孢杆菌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．56

    （2）枯草芽孢杆菌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．60

    （3）枯草芽孢杆菌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．63

    五、结束语．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．65

    枯草芽孢杆菌Est13酶在酵母中的表达优化及降解效能研究（2）．．66

    一、内容概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．66

    1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．68

    1.2研究目的与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．69

    1.3研究方法与技术路线．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．71

    二、枯草芽孢杆菌Est13酶的基因克隆与表达载体构建．．．．．．．．．．．72

    2.1Est13酶基因的克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．74

    2.2表达载体的构建与筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．77

    2.3酵母细胞的遗传转化与筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．79

    三、表达优化策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．80

    3.1基因序列分析与改造．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．82

    3.2表达载体选择与构建策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．83

    3.3表达条件优化与筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．84

    四、表达产物的功能鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．86

    4.1酶活性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

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