色谱分析法导论.pptVIP

注意6.分配系数K及容量因子k’与选择性因子的关系第29页，共82页，星期日，2025年，2月5日从色谱流出曲线上，得到信息是：（l）根据色谱峰的个数，可以判断样品中所合组份的最少个数．（2）根据色谱峰的保留值(或位置），可以进行定性分析．（3）根据色谱峰下的面积或峰高，可以进行定量分析．（4）色谱峰的保留值及其区域宽度，是评价色谱柱分离效能的依据．（5）色谱峰两峰间的距离，是评价固定相(和流动相)选择是否合适的依据．第30页，共82页，星期日，2025年，2月5日14-3色谱法基本理论色谱理论需要解决的问题：色谱分离过程的热力学和动力学问题。影响分离及柱效的因素与提高柱效的途径，柱效与分离度的评价指标及其关系。组分保留时间为何不同？色谱峰为何变宽？组分保留时间：色谱过程的热力学因素控制；（组分和固定液的结构和性质）色谱峰变宽：色谱过程的动力学因素控制；（两相中的运动阻力，扩散）两种色谱理论：塔板理论和速率理论；第31页，共82页，星期日，2025年，2月5日14-3-1塔板理论（platetheory）-柱分离效能指标半经验理论；将色谱柱比作蒸馏塔，把一根连续的色谱柱设想成是由许多小段组成。在每一小段内，一部分空间被固定相占据，另一部分空间被流动相占据。组分随流动相进入色谱柱后，就在两相间进行分配。第32页，共82页，星期日，2025年，2月5日塔板理论的假设：（1）在每一个小段内，平衡可以迅速达到；（2）将载气看作成脉动（间歇）过程；（3）试样沿色谱柱方向的扩散可忽略；（4）每次分配的分配系数相同。理论塔板高度H：理论塔板数n：色谱柱长：则三者的关系为：使组分在柱内两相间达到一次平衡分配所需的柱长；组分流过色谱柱时在两相间进行平衡分配的次数；L；第33页，共82页，星期日，2025年，2月5日塔板理论指出：溶质在柱中的平衡次数，即n＞50时，可得到基本对称的峰形曲线。试样进入色谱柱后，只要各组分在两相间的分配系数有微小差异，经过反复多次的分配平衡后，就可获得良好的分离。由塔板理论推导出的理论塔板数n的计算公式为：扣除死时间，将有效理论塔板数作为柱效能指标：第34页，共82页，星期日，2025年，2月5日注意：同一色谱柱对不同物质的柱效是不同的。因此说明柱效时除应注明色谱条件外，还应指出是用什么物质测量的。同理，比较不同柱子的柱效时，必须把操作条件固定下来，用同一种物质通过不同的色谱柱，从所得的色谱峰分别计算n有效，该值↑，柱效↑。第35页，共82页，星期日，2025年，2月5日例：已知一根长1m的色谱柱的n有效为1600块，组分A在该柱上的调整保留时间为100s，试求A峰的半峰宽及有效塔板高度。解：第36页，共82页，星期日，2025年，2月5日例：色谱法分离A、B物质的混合物，测得B物质的半峰宽为9mm，调整保留时间为3min20s，记录仪的走纸速度为3000mm/h，该色谱柱的有效理论塔板数是多少？解：第37页，共82页，星期日，2025年，2月5日例：在2m长的色谱柱上，测得某组分保留时间为6.6min，峰底宽0.5min，死时间1.2min，载气体积流速为40mL·min-1，固定相体积为2.1mL，求：（1）分配比k’；

（2）死体积VM；

（3）调整保留体积V’R；

（4）分配系数K；

（5）有效塔板数；

（6）有效塔板高度（流动相体积即为死体积）。第38页，共82页，星期日，2025年，2月5日例：在2m长的色谱柱上，测得某组分保留时间为6.6min，峰底宽0.5min，死时间1.2min，载气体积流速为40mL·min-1，固定相体积为2.1mL，求：（1）分配比k’；（2）死体积VM；（3）调整保留体积V’R；（4）分配系数K；（5）有效塔板数；（6）有效塔板高度（流动相体积即为死体积）。解：分配比k=t’R/tM=(6.6-1.2)/1.2=4.5死体积VM=tMFc=1.2×40=48(mL)调整保留体积V’R=t’RFc=(6.6-1.2)×40=216(mL)分配系数K=k’β=k’(Vm/Vs)=4.5×(48/2.1)=103有效塔板数neff=16×(t’R/Wb)2=16×[(6.6-1.2)/0.5]2=1866有效塔板高度Heff=L/neff=2×1000/1866=1.0