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第56卷第3期海洋与湖沼Vol.56,No.3
2025年5月OCEANOLOGIAETLIMNOLOGIASINICAMay2025
水产甲壳类抗病免疫增强剂快速筛选
与评估技术的研究*
11133
林锋黄爱霞王雨辰孙伟杰陆静
22①1①
周阳陈克平郝贵杰
(1.农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室湖州市水产品品质提升与加工技术重点实验室浙江省淡水水产研究所
浙江湖州313001;2.江苏大学生命科学学院江苏镇江212013;3.嘉兴市农业科学研究院桐乡
农业科学研究所浙江桐乡314500)
摘要甲壳类水产品是水产养殖中的重要组成部分,通过拌喂中草药免疫增强剂的方式提高虾蟹自
身的抗病免疫力,已成为甲壳类病害防治的首选方式。以罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)为研究
对象,将20种类免疫增强剂分别以3个梯度浓度加入虾血淋巴细胞培养液中,分析非特异性免疫指标
表达差异,结合口服免疫增强剂试验比较评估,构建一种甲壳类免疫增强剂体外筛选和评估方法。结
果表明,综合LZM、ACP、AKP、SOD、POD和PO等6项免疫指标的测定值,预筛选出5种具有潜在提
高罗氏沼虾非特异性免疫力的黄芩苷、茶树菇多糖、左旋咪唑等成分;在罗氏沼虾中的LZM、ACP、
SOD、PO免疫效果与预期吻合,明显高于对照组,且存活率高于对照组19%,平均增重为对照组的1.3
倍;完成了罗氏沼虾与免疫相关的microRNA的筛选,建立对免疫增强剂免疫效果进行反向评估验证,
成功获得3个可用于免疫效果评估的microRNA分子。利用免疫增强剂待选品在甲壳类血淋巴细胞
中的短期原代培养,能够实现在体外高通量快速筛选免疫增强剂,该方法的构建可以为甲壳类抗病免
疫增强剂的深入研究提供有效支撑。
关键词甲壳类;罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii);原代培养;免疫增强剂;筛选
中图分类号Q956;S945;S966.1doi:10.11693/hyhz20241200279
中国作为水产养殖大国,虾蟹产业在水产养殖业为抗病力的下降,野田村病毒(MrNV)、虾血细胞虹彩
中的比重也逐年增加。近年来病害已成为影响全国虾病毒(SHIV)、霍乱弧菌等多种病毒及病原微生物对罗
蟹养殖发展的主要威胁。以罗氏沼虾为例,截至2020氏沼虾育苗及养殖造成严重影响。
年,全国产业达到300多家育苗场,年育苗量400亿在虾蟹病害防治过程中,常规主要是使用抗菌素
尾以上,养殖面积约33000hm2,养殖产量16.18万t,及一些化学药物,但抗生素频繁和大量使用存在耐药
已成为世界上罗氏沼虾养殖产量最高的国家(林锋,性、虾蟹自身免疫力下降及药物残留等问题。免疫增
2018)。但由于种质衰退严重,以及病原微生物的侵强剂在提高动物非特异免疫力及调节免疫系统方面具
害、养殖环境恶化等多种因素,导致罗氏沼虾的育苗和有很好的效果(米少辉等,2021),已广泛应用于水产养
养殖过程中疾病频发,严重影响产业发展。突出表现殖中。鱼类免疫增强剂可分为以下几类:动植物提取
*国家自然科学基金青年项目,号;浙江省属科研院所扶
人力资源管理师持证人
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