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异源基因SbSnRK21过表达对拟南芥抗盐性的提升研究

目录

异源基因SbSnRK21过表达对拟南芥抗盐性的提升研究（1）．．．．．．．．5

一、文档简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.1.1盐胁迫对农业生产的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

1.1.2植物耐盐机制研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

1.2碘化物信号转导蛋白SnRK2/3研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

1.2.1SnRK2/3蛋白结构与功能概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

1.2.2SnRK2/3在植物响应盐胁迫中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

1.3烤烟SnRK21基因简介．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

1.3.1SbSnRK21基因的克隆与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

1.3.2SbSnRK21基因初步功能推测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

1.4本研究的内容与目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

二、研究方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

2.1实验材料与处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

2.1.1拟南芥野生型与过表达菌株介绍．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

2.1.2基因过表达载体的构建与遗传转化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

2.1.3耐盐性胁迫处理方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

2.1.4筛选与鉴定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

2.2.1实生苗生理指标测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49

2.2.2群体生物学性状测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52

2.2.3基因表达水平检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

2.2.4蛋白表达水平检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54

2.2.5代谢产物分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55

三、结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57

3.1SbSnRK21过表达拟南芥的表型观察与生理响应．．．．．．．．．．．．．．61

3.1.1耐盐性表型差异．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．62

3.1.2生理生化指标变化分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．65

3.2SbSnRK21过表达对拟南芥生长发育的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．68

3.2.1生长指标的测定结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．69

3.2.2对盐胁迫下生长的改善效果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．73

3.3SbSnRK21基因在盐胁迫下的表达模式分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．75

3.4SbSnRK21过表达拟南芥体内抗氧化系统响应．．．．．．．．．．．．．．．．78

3.5SbSnRK21过表达拟南芥渗透调节物质积累变化．．．．．．．．．．．．．．79

四、讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．84

4.1SbSnRK21过表达提升拟南芥耐盐性的机制阐释．．．．．．．．．．．．．．85

4.2SbSnRK21作为耐盐候选基因的潜力评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．86

4.3与其他耐盐基因功能比较．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．89

4.4本研究存在的不足与展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．