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酶快速反应动力学

第一章绪论IntroductiontoEnzymeKinetics

单击此处可添加副标题酶反应的稳态动力学和瞬变动力学酶反应动力学是解释酶反应机制具有代表性的方法。酶动力学包括两个方面，即酶的稳态动力学（Steady-statekinetics）和预稳态动力学（Pre-steadystatekinetics），后者也叫瞬变动力学（Transientkinetics）。酶的稳态动力学的基本目标是对酶催化的总反应进行测量与分析，只涉及底物与产物，而不考察酶分子本身。预稳态动力学可以直接研究总反应中所包含的分步反应。研究者的兴趣所在是酶分子本身所发生的变化或能够反映这种变化的变化上。两种动力学方法各有其优缺点。稳态动力学由于所要求酶制剂用量少，且不需要使用特殊的仪器设备，因而长久以来获得了广泛的应用。这种方法的缺点在于研究人员所获得的信息是间接的，有时也是不确切的。预稳态动力学由于测量快速反应，而需要特殊的仪器设备（例如，停流装置）。它的优点是可以提供用来解释复杂反应机制的信息。应该指出，两种方法是相辅相成的，对于研究酶反应来说都很重要。单击此处添加大标题内容

从二十世纪60年代起，测量快速反应的技术发展很快，性能越来越好的测量快速反应的装置（如，停流分光光度计等）被不断推出，这给研究酶反应的瞬变动力学提供了很大的方便。第一节研究酶反应的历史一.Henri的工作Henri在1902年发表了一篇论文。他首次引入了一个十分重要的概念，既酶与底物符合物的概念，并把它用到速度方程的推导中。随后，他讨论和阐述了重要的酶反应的动力学特征，涉及到三种酶反应：1.蔗糖转化酶(Invertase)催化蔗糖的转化；2.淀粉酶(Amylase)催化糊精的水解；3.苦杏仁酶(Emulsin)催化水杨苷的水解。对实验结果归纳成如下几个要点：1.当底物浓度低时，酶催化的水解速度随底物浓度的增加而增加；

当底物浓度高时，水解速度保持恒定。反应速度与酶浓度成正比；产物的加入引起反应速度的减少，在低底物浓度时，减少尤明显。上述实验结果可以用下面两种反应机制解释,机制I:(1.1.1)(1.1.2)机制II:(1.1.3)(1.1.4)

如果考虑产物与酶结合生成EP，那么要把下述平衡包括到上述每一个机制中去，(1.1.5)在上述两种机制中，ES符合物的形成是共同的，然而所起的作用却是完全不同的。在机制I中，产物的形成是通过一个双分子过程（1.1.2式），即酶与底物的碰撞。在此种情况下，ES符合物是无意义的，它通过减少E浓度而降低产物的形成速度。另一方面，在机制II中，ES是至关重要的符合物，经过一个单分子过程（1.1.4式），ES复合物形成产物。下面要推导出能同时满足上述两种机制的速度方程。当考虑EP复合物的形成时，酶以三种形式存在：E,ES和EP。因此，酶的总浓度为e0=[E]0=[E]+[ES]+[EP](1.1.6)假定在酶反应中，下述平衡迅速建立起来

应用质量作用定律，有(1.1.7)其中，m和n为平衡常数，x为底物在时间t时的浓度，那么，[S]=a-x，这里a为底物起始浓度。[P]=x,这是两个可以测量的量。式1.1.6,1.1.7和1.1.8组成一个联立方程组，含有三个未知量。{E]和[ES]的表达式为，(1.1.10)(1.1.8)(1.1.9)12345

利用1.1.9和1.1.10式，产物P生成的速度方程可以推倒如下，对于机制I,P通过一个双分子过程形成，产物的生成速度为(下面式子应为k’+1)对于机制II，产物以单分子过程形成(1.1.4式)，产物的生成速度为：(1.1.11)和(1.1.12)式仅差一个