基于多功能纳米胶束的胶质母细胞瘤靶向治疗研究.pdfVIP

摘要

胶质母细胞瘤（Glioblastoma，GBM）是恶性程度最高的颅内胶质瘤，它的

传统治疗方式采用手术切除并结合化疗，但其治疗预后很差，中位生存期仅约为

15个月，5年生存率不到10%。当前治疗胶质母细胞瘤有两大难点，一是常规化

疗在消除肿瘤病灶的同时也对正常组织产生较大的毒副作用；二是具有特殊结构

的血脑屏障（Blood-brain-barrier，BBB）阻碍了98%的药物到达胶质母细胞瘤，

并影响药物发挥疗效。近年来纳米技术蓬勃发展，新型纳米材料用于胶质母细胞

瘤治疗备受关注，这为胶质母细胞瘤的临床转化提供了新的策略。

胶质母细胞瘤的治疗难点是血脑屏障，使用低频率低强度超声（Ultrasound，

US）可短暂可逆地开放血脑屏障。本课题设计并构建了具有靶向性序列（RGD）

且含有细胞穿透肽序列（GR）的双亲性多肽（CGRRGDS），其包载声敏剂孟

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加拉玫瑰红（RoseBengal，RB），在水相中自组装形成了粒径为76.34±1.56nm

的单分布纳米胶束（PeptideAmphiliphile-RBNano-micelles，PARN），以期其在

低频率低强度超声下用于胶质母细胞瘤治疗。选用小鼠脑微血管内皮细胞

（bEnd.3）搭建体外血脑屏障模型，通过显微镜观察细胞、4h渗漏实验、跨内

皮细胞电阻抗（Transepithelialelectricalresistance，TEER）实验、荧光素钠通透

性实验对体外血脑屏障模型进行通透性评价，以验证体外血脑屏障模型的成功构

建。基于该体外血脑屏障模型，进一步验证了低频率低强度超声可有效打开血脑

屏障，增加纳米胶束的渗透量。整合素αβ受体通常在胶质母细胞瘤细胞（U-

V3

87MG）膜表面过表达，且可被RGD肽段特异性识别，结合这一特点，本课题所

制备的纳米胶束在体外实验中可特异性识别人胶质母细胞瘤（U-87MG）。在超

声辐照下，该纳米胶束在U-87MG细胞中生成大量活性氧簇（Reactiveoxygen

species，ROS）诱导胶质母细胞瘤的凋亡，在杀死90%以上的U-87MG细胞的同

时，依然可保证bEnd.3细胞72.95%的存活率，即在实现声动力治疗（Sonodynamic

therapy，SDT）消除肿瘤病灶目的的同时，不对正常细胞及组织产生明显伤害。

综上所述，本课题所制备的纳米胶束联合低频率低强度超声能有效开放血脑

屏障并释放大量的活性氧簇，并同时实现胶质母细胞瘤的声动力治疗。纳米胶束

联合超声用于胶质母细胞瘤的血脑屏障开放及声动力治疗这一策略在体外细胞

实验中得到了验证，下一步计划将使用原位荷瘤裸鼠进行实验，从而验证这一策

略对于活体动物的可行性，为未来的临床转化奠定了一定的理论和实验基础。

关键词：胶质母细胞瘤，血脑屏障，纳米胶束，靶向识别，声动力治疗

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ABSTRACT

Glioblastoma(GBM)isthemostmalignantandaggressivebraintumors.The

traditionaltreatmentofglioblastomaisusuallybasedonthecombinationofsurgeryand

chemotherapywhichaffordedpoorprognosis.Themediansurvivaltimeisonlyabout

15months,whilethe5-yearsurvivalrateislessthan10%.Atpresent,therearetwo

bottlenecksinthetreatmentofglioblastoma:thesideeffectso