2026创新设计高考总复习生物（人教版）强化练习-限时练51 基因工程的基本工具和操作程序.docxVIP

限时练51基因工程的基本工具和操作程序

(时间：40分钟分值：40分)

一、选择题(本题5小题，每题2分，共10分)

1.(2025·湖北襄阳四中联考)大肠杆菌puC118质粒是基因工程中常用的一种载体，具有氨苄青霉素抗性基因，该质粒中某限制酶的唯一切点位于LacZ基因中。在特定的选择培养基中，若LacZ基因没有被破坏，则大肠杆菌菌落呈蓝色；若LacZ基因被破坏，则菌落呈白色。关于图中操作的叙述正确的是()

试管1中应加入限制酶和DNA连接酶

试管2中将重组质粒导入大肠杆菌，需用Ca2＋处理大肠杆菌

能在氨苄青霉素培养基中存在的菌落均呈现白色

试管3应选择蓝色菌落内的大肠杆菌进行扩大培养

2.(2025·山东检测)由于PCR扩增出的目的基因末端为平末端，且无合适的限制酶识别序列，需借助中间载体P将目的基因接入载体E。下图为两种载体的结构和相关限制酶的识别序列，下列叙述正确的是()

构建重组载体P时，应选择EcoRⅤ进行酶切，再用T4DNA连接酶连接

为了便于该目的基因接入载体E，可用限制酶EcoRⅤ或SmaⅠ切割载体P

载体P不能作为基因表达载体，是因为它不含起始密码子和终止密码子

若受体细胞表现出抗性基因的相应性状，表明重组载体成功导入受体细胞

3.(2025·山东模拟预测)研究人员用酶M和酶N两种限制酶同时处理某DNA分子和质粒，得到的DNA片段如图所示。图中DNA片段只注明了黏性末端处的碱基种类，其他碱基的种类未注明。下列叙述错误的是()

该DNA分子和质粒上均含有酶M的一个切割位点和酶N的一个切割位点

根据图示信息不能确定图中形成的不同黏性末端与这两种限制酶的对应关系

用T4DNA连接酶或E.coliDNA连接酶均可以将片段乙和片段丁连接起来

片段乙、片段丁、片段戊可依次连接形成一个环状DNA分子

4.(2025·北京朝阳模拟)酵母人工染色体pYAC2是以酵母菌为受体细胞构建基因文库时的常用载体。如图为pYAC2的结构示意图，导入受体细胞前用限制酶BamHⅠ切割可使其成为线性的染色体。pYAC2适配的受体菌菌落呈红色，sup4基因表达能够抑制其性状表现，使菌落呈白色。下列相关叙述错误的是()

导入pYAC2的受体菌能够在不含色氨酸的培养基中生存

用BamHⅠ切割pYAC2后，TEL端粒序列位于染色体的两端

着丝粒序列CEN4的存在可防止pYAC2在细胞分裂中丢失

将带有目的基因的重组pYAC2导入受体菌后应挑选白色菌落

5.(不定项)(2025·山东泰安模拟预测)为使玉米获得抗除草剂性状，科研人员进行了相关操作(如图所示)。含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达，其正确表达产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列叙述错误的是()

T－DNA可将基因G转移并整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上

利用物质K和抗生素进行筛选1，可获得农杆菌的蓝色菌落

利用物质K和除草剂进行筛选2，更易于获得抗除草剂的转基因植株

提高培养基中细胞分裂素和生长素的比值，有利于诱导生根

二、非选择题(共30分)

6.(15分)(2024·河北卷，22)新城疫病毒可引起家禽急性败血性传染病，我国科学家将该病毒相关基因改造为r2HN，使其在水稻胚乳特异表达，制备获得r2HN疫苗，并对其免疫效果进行了检测。

回答下列问题：

(1)(5分)实验所用载体的部分结构及其限制酶识别位点如图1所示。其中GtP为启动子，若使r2HN仅在水稻胚乳表达，GtP应为____________启动子。Nos为终止子，其作用为___________________________________________________。

r2HN基因内部不含载体的限制酶识别位点。因此，可选择限制酶________和________对r2HN基因与载体进行酶切，用于表达载体的构建。

(2)(3分)利用________方法将r2HN基因导入水稻愈伤组织。为检测r2HN表达情况，可通过PCR技术检测____________________，通过________技术检测是否翻译出r2HN蛋白。

(3)(3分)获得转基因植株后，通常选择单一位点插入目的基因的植株进行研究。此类植株自交一代后，r2HN纯合体植株的占比为________。选择纯合体进行后续研究的原因是____________________________________________________

___________________________________________________________________。

(4)(2分)制备r2HN疫苗后，为研究其免疫效果，对实验组鸡进行接种，对照组