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步骤和方法1.接种工具2.接种环境3.接种方法→接种前首先检查培养基的外观,其次在培养基上进行标识。①倾注法②液体接种法③半固体接种法④斜面接种法⑤平板接种法a连续划线法b分区划线法c棋盘格划线法d涂抹法e自动接种仪接种法第15页,共58页,星期日,2025年,2月5日4.细菌培养的方法①需氧培养法②厌氧培养法③二氧化碳培养法④微需氧培养法5.培养:将接种好的培养基置于35℃培养箱中孵育18~24h,取出观察并进一步检验。第16页,共58页,星期日,2025年,2月5日接种环图片接种环(针)示意图铂丝→镍丝第17页,共58页,星期日,2025年,2月5日酒精灯使用方法第18页,共58页,星期日,2025年,2月5日电子灭菌器第19页,共58页,星期日,2025年,2月5日分区划线分离法及培养后菌落分布示意图第20页,共58页,星期日,2025年,2月5日穿刺接种方法第21页,共58页,星期日,2025年,2月5日斜面接种方法第22页,共58页,星期日,2025年,2月5日液体培养基接种方法第23页,共58页,星期日,2025年,2月5日第24页,共58页,星期日,2025年,2月5日第25页,共58页,星期日,2025年,2月5日实验内容1.菌种:金黄色葡萄球菌肺炎克雷伯菌大肠埃希菌铜绿假单胞菌乙型溶血性链球菌(A群链球菌)枯草芽孢杆菌2.接种方法血平板→三分区划线,接种金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌。营养琼脂平板→三分区划线,接种金葡和铜绿假单胞菌。麦康凯平板→三分区划线,接种大肠、铜绿、金葡和A链。斜面→连续划线(密而不重),接种铜绿假单胞菌。半固体→穿刺(需一次进行),接种大肠埃希菌和肺克。液体培养基→接种金葡、A群链球菌和枯草芽孢杆菌。3.培养方法:需氧培养4.达到目的:掌握各种接种方法及无菌操作要领,树立和牢记无菌操作的意识。第26页,共58页,星期日,2025年,2月5日实验三、细菌生长现象观察与革兰染色第27页,共58页,星期日,2025年,2月5日实验目的1、掌握观察及描述细菌菌落的方法。2、掌握细菌涂片的制作过程及革兰染色的原理方法和细菌形态观察。3、熟悉细菌在各种培养基上的生长现象及意义。第28页,共58页,星期日,2025年,2月5日器材和试剂1.菌种:同实验二培养基:同实验二试剂:革兰染液、无菌生理盐水。4.其它:载玻片、显微镜、酒精灯等第29页,共58页,星期日,2025年,2月5日步骤和方法1、细菌生长现象的观察1)固体培养基a平板培养基:菌落描述:颜色、大小、表面、边缘、湿润程度溶血现象、色素、特殊气味等。b斜面培养基:观察菌苔特征。2)液体培养基:混浊生长、沉淀生长和表面生长。3)半固体培养基:观察细菌是否有动力。第30页,共58页,星期日,2025年,2月5日2、细菌涂片的制作过程涂片→→→干燥→→→固定3、革兰染色的原理1)细胞壁结构学说2)细菌等电点学说3)化学学说→→→核糖核酸镁盐4、革兰染色的方法初染→→→媒染→→→脱色→→→复染一紫二碘三酒精第四复红皆水冲时间要看说明书阴性菌红阳性紫5、染色结果的观察:要求绘图。6、影响染色结
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