北京pcr上岗证培训考试题及答案.docVIP

北京pcr上岗证培训考试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.PCR技术的中文全称是（）

A.聚合酶链式反应

B.核酸杂交反应

C.基因测序反应

D.蛋白质电泳反应

2.Taq酶的特点是（）

A.耐高温

B.耐低温

C.催化效率低

D.特异性差

3.PCR反应体系中不包含以下哪种成分（）

A.引物

B.dNTP

C.模板DNA

D.限制性内切酶

4.引物设计时，其长度一般为（）

A.5-10bp

B.15-30bp

C.35-50bp

D.50bp以上

5.以下哪种物质可用于PCR反应的缓冲体系（）

A.Tris-HCl

B.NaCl

C.KCl

D.以上都是

6.PCR反应中，变性温度一般为（）

A.55℃

B.72℃

C.94-95℃

D.4℃

7.PCR技术的发明人是（）

A.克里克

B.穆利斯

C.沃森

D.桑格

8.在PCR反应中，延伸时间主要取决于（）

A.引物长度

B.模板长度

C.退火温度

D.酶的活性

9.下列关于PCR引物的说法，错误的是（）

A.引物是PCR反应的起始点

B.引物与模板DNA要特异性结合

C.引物的5’端可以被修饰

D.引物的3’端可以随意设计

10.PCR产物的检测通常采用（）

A.凝胶电泳

B.离子交换色谱

C.亲和色谱

D.气相色谱

答案：1.A2.A3.D4.B5.A6.C7.B8.B9.D10.A

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.PCR技术的应用领域包括（）

A.疾病诊断

B.法医鉴定

C.基因克隆

D.物种进化研究

2.影响PCR反应的因素有（）

A.引物质量

B.模板浓度

C.酶的用量

D.反应温度和时间

3.以下属于PCR反应中常用的酶有（）

A.Taq酶

B.Pfu酶

C.Klenow片段

D.反转录酶

4.引物设计的原则包括（）

A.避免引物自身互补

B.避免引物之间互补

C.引物的GC含量在40%-60%

D.引物3’端碱基最好为G或C

5.PCR反应的基本步骤包括（）

A.变性

B.退火

C.延伸

D.沉淀

6.用于PCR的模板DNA可以来源于（）

A.血液

B.组织

C.唾液

D.毛发

7.在PCR实验中，可能出现的问题有（）

A.非特异性扩增

B.引物二聚体形成

C.扩增效率低

D.模板降解

8.以下哪些物质可以添加到PCR反应体系中提高反应效率（）

A.DMSO

B.BSA

C.甘油

D.乙醇

9.实时荧光定量PCR可以用于（）

A.基因表达水平的检测

B.病原体核酸定量

C.单核苷酸多态性分析

D.甲基化分析

10.巢式PCR的优点有（）

A.提高特异性

B.提高灵敏度

C.减少非特异性扩增

D.操作简单

答案：1.ABCD2.ABCD3.AB4.ABCD5.ABC6.ABCD7.ABCD8.ABC9.AB10.ABC

三、判断题（每题2分，共20分）

1.PCR反应中，退火温度越高，引物与模板的结合越稳定，扩增效果越好。（）

2.Taq酶具有3’→5’外切酶活性，因此保真性高。（）

3.引物的浓度越高，PCR反应的效果越好。（）

4.PCR反应可以扩增任意长度的DNA片段。（）

5.模板DNA的纯度对PCR反应结果没有影响。（）

6.实时荧光定量PCR可以对核酸进行绝对定量和相对定量。（）

7.只要引物设计正确，PCR反应就一定能得到预期产物。（）

8.在PCR反应中，Mg2?浓度对酶的活性有重要影响。（）

9.降落PCR可以提高PCR反应的特异性。（）

10.进行PCR实验时，实验器材不需要进行严格的灭菌处理。（）

答案：1.×2.×3.×4.×5.×6.√7.×8.√9.√10.×

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述PCR技术的原理。

答案：以模板DNA为基础，在引物、dNTP、Taq酶等作用下，经过变性（使双链DNA解开）、退火（引物与模板结合）、延伸（Taq酶催化合成新的DNA链）三个步骤循环