真核基因表达调控.pptVIP

Fire（美国卡内矶研究所）Mello（美国麻州大学）双链RNA是导致线虫par-1基因沉默的原因，并称之为RNA干扰(RNAinterference)。GuoKemphuse（美国康乃尔大学）正义和反义RNA都能导致线虫par-1基因沉默。第62页，共81页，星期日，2025年，2月5日DegradedRNA(Genesilencingorvirusresistance)DICER(dsRNase)(DCLs)21-25ntsmallRNAs(siRNAs)ComplexformationRISCcomplexTargetssmRNAorviralRNAEndonuclease(s)Exonuclease(s)dsRNARdRPAmplificationSystemicsilencingLong-distancesignalsCH3CH3CH3HomologousDNARNA-directedDNAmethylation4、RNA沉默的可能机理第63页，共81页，星期日，2025年，2月5日5、RNA沉默的功能PTGS在生物界中是一种普遍现象，是真核生物长期进化过程中形成的一种抵御病毒、转座子等外来核酸的入侵、识别并抑制外源基因的表达，维持生物基因组稳定性的重要防御机制。第64页，共81页，星期日，2025年，2月5日6、RNA沉默应用

ApplicationsofRNAsilencing（1）基因功能分析（2）培育抗病毒作物（3）作物品质遗传改良第65页，共81页，星期日，2025年，2月5日HowtoSilencingaGenehairpinRNAtransgeneAAAAAAA-complementaryregionsPromoterTerminatormRNAHairpinRNA第66页，共81页，星期日，2025年，2月5日二、MiRNA(MicroRNA)与基因表达调控（一）特点：1、miRNAs是一种21－25nt长的小分子RNA2、具有高度的保守性、时序性和组织特异性3、主要作用于靶标基因3′-UTR区，阻遏翻译（二）功能：主要在发育过程中起作用，调节内源基因表达第67页，共81页，星期日，2025年，2月5日（三）MiRNA的生成及作用机制第68页，共81页，星期日，2025年，2月5日MiRNA作用模式1、与靶标基因3′-UTR区不完全互补结合，阻遏翻译而不影响mRNA的稳定性（这种miRNA是目前发现最多的种类，如线虫lin-4）2、与靶标基因完全互补结合，作用方式和功能与siRNA非常类似，最后切割靶mRNA，这说明某些miRNA和siRNA一样参与了机体内一些特异性mRNA的剪切过程。（如拟南芥miR-171）3、具有以上两种作用模式，当与靶标基因完全互补结合时，直接靶向切割mRNA；当与靶标基因不完全互补结合时，阻遏基因的翻译（如线虫let-7）第69页，共81页，星期日，2025年，2月5日（四）小RNA的研究的启示1、基因组非蛋白编码区可能蕴含着重要的生命功能活动信息。2、生命的一些重要活动如幼虫的生长发育、细胞的发生和分化、神经系统的分化等都被一些非编码小RNA的调控第70页，共81页，星期日，2025年，2月5日附：RNA的功能（1）储存遗传信息，如RNA病毒（2）mRNA：进行遗传信息的传递，作为蛋白质合成的模板（3）rRNA：可装配成核糖体，参与蛋白质合成（4）tRNA：携带氨基酸，参与蛋白质的合成（5）核酶：内含子的自我剪接等（6）MicroRNA：基因表达的调控，在发育过程中起作用（7）SiRNA：抑制病毒、转座子等外源基因的表达（8）指导RNA：参与RNA的编辑（9）SnoRNA：可能与RNA的甲基化有关（10）SnRNA：参与RNA的加工（如剪接）（11）端粒酶中的RNA：与端粒的复制有关第71页，共81页，星期日，2025年，2月5日三、RNA加工的调节（一）可变mRNA的加工通过使用不同的polyA位点或不同的剪接方式将前mRNA转化为一种以上的成熟mRNA

（二）可变mRNA加工的类型1、利用不同的启动子2、利用不同的poly（A）位点3、选择性剪接第72页，共81页，星期日，2025年，2月5日1、利用不同的启动子在唾液腺中，特定的转录因子使淀粉酶基因从上游启动子开始转录在肝细胞中，使用下游启动子第73页，共81页