医学课件-检验科流式细胞仪检测哪些项目.pptx

医学课件-检验科流式细胞仪检测哪些项目汇报人：XXX2025-X-X

目录1.流式细胞仪简介

2.流式细胞仪检测原理

3.流式细胞仪检测项目

4.流式细胞仪检测技术

5.流式细胞仪检测应用案例

6.流式细胞仪检测注意事项

7.流式细胞仪检测质量控制

8.流式细胞仪检测发展趋势

01流式细胞仪简介

流式细胞仪的基本原理激光光源流式细胞仪采用激光作为光源，通常使用氩离子激光器，波长为488nm，提供稳定的光能量。激光束经过聚焦后照射到样品上，激发样品中的荧光分子。光散射检测流式细胞仪通过检测光散射信号来分析细胞的大小和形状。前向散射光（FSC）主要反映细胞大小，侧向散射光（SSC）则反映细胞内部结构。荧光检测流式细胞仪使用荧光染料标记细胞，通过检测荧光信号来分析细胞表面或内部的分子表达情况。常用的荧光染料有PE、APC、FITC等，每种染料都有其特定的激发和发射波长。

流式细胞仪的类型单激光系统单激光系统使用单一波长激光，成本较低，适用于常规细胞计数和基本细胞分析。例如，使用488nm激光进行FITC荧光标记的检测。多激光系统多激光系统可同时使用多种波长的激光，提供更广泛的检测范围，适用于更复杂的细胞分析。例如，使用355nm、405nm、488nm和633nm等激光进行多种荧光染料的检测。流式细胞分选仪流式细胞分选仪除了检测细胞外，还能实现细胞的实时分选。通过控制激光束和喷嘴的压力，可以将特定细胞分离出来，常用于细胞分离和基因编辑等研究。

流式细胞仪的应用领域免疫学分析流式细胞仪在免疫学领域应用广泛，可用于T细胞、B细胞、NK细胞等免疫细胞的检测和功能分析，例如CD4+/CD8+比例检测，帮助评估免疫系统状态。肿瘤研究在肿瘤研究中，流式细胞仪用于检测肿瘤标志物、分析肿瘤细胞免疫原性，如检测CD19/CD20在非霍奇金淋巴瘤中的应用，以及肿瘤细胞表面受体表达分析。血液病诊断血液病诊断中，流式细胞仪是重要的检测工具，可以检测白血病、淋巴瘤等血液系统疾病，如通过分析细胞周期和核型来诊断急性淋巴细胞白血病。

02流式细胞仪检测原理

激光散射原理前向散射前向散射光(FSC)检测细胞大小，当激光束垂直照射到细胞上时，细胞体积越大，散射光强度越强。FSC信号可用于区分不同大小的细胞群，如白细胞分类。侧向散射侧向散射光(SSC)反映细胞内部结构，当激光束从侧面照射到细胞上时，细胞内部颗粒越多，散射光强度越强。SSC信号可用于区分细胞内部复杂性和细胞类型。角散原理角散原理是指光在不同介质界面发生折射时，入射角和折射角之间的关系。流式细胞仪利用角散原理，通过测量光散射角度来分析细胞的大小和形状。

荧光检测原理荧光染料荧光检测原理基于荧光染料，这些染料具有特定的吸收和发射光谱。细胞样本被特定荧光染料标记后，激光照射时染料吸收光能并发出荧光。激发与发射荧光染料在激发光照射下吸收光能，跃迁到激发态，随后释放光能回到基态，发射出荧光。发射光的波长通常比激发光的波长长，这一现象称为斯托克斯位移。检测系统流式细胞仪的检测系统包括光电倍增管等光电探测器，用于检测荧光信号的强度和波长。通过分析荧光信号，可以确定细胞表面或内部的特定分子表达情况。

细胞分选原理气流分选细胞分选通过高速气流将细胞分离，根据细胞大小和密度差异进行分选。高速气流使细胞以一定角度撞击到分选孔板上，不同大小的细胞被不同孔径的孔分离。压力控制分选过程中，通过精确控制压力来调整细胞流动速度，确保细胞以均匀速度通过分选区域。压力控制对分选效率和细胞损伤至关重要。实时监测流式细胞分选仪实时监测细胞通过分选区域的情况，通过调整激光束和喷嘴的压力，可以精确控制细胞分选过程，实现高纯度细胞分离。

03流式细胞仪检测项目

血液细胞计数细胞分类计数血液细胞计数通过流式细胞仪对白细胞、红细胞、血小板等不同类型细胞进行分类和计数，通常每秒可分析数千个细胞。自动化分析流式细胞仪采用自动化分析技术，自动识别细胞类型，快速准确地进行血液细胞计数，提高了检测效率和准确性。参数检测除了计数，流式细胞仪还能检测细胞体积、核质比等参数，为临床诊断提供更全面的信息，如白血病、贫血等血液疾病的辅助诊断。

免疫细胞亚群分析T细胞亚群流式细胞仪可分析T细胞亚群，如CD4+和CD8+细胞的比率，对于了解免疫系统功能和疾病诊断具有重要意义。正常情况下，CD4+/CD8+比例约为1.7:1。B细胞检测通过流式细胞仪，可以检测B细胞的亚群，如记忆B细胞和浆细胞，这对于评估疫苗接种效果和自身免疫性疾病的研究至关重要。NK细胞分析流式细胞仪还能检测NK细胞亚群，如CD56+和CD16+，这对于研究免疫监视和肿瘤免疫治疗中的细胞功能有重要作用。

肿瘤标志物检测CEA检测CEA（癌胚抗原）检测是常用的肿瘤标志物之一，适用于多种癌症的