苦碟子治疗大鼠肝纤维化的实验研究.docxVIP

苦碟子治疗大鼠肝纤维化的实验研究

摘要

观察苦碟子对肝纤维化的治疗作用，探讨其治疗肝纤维化的作用机制。采用CCL4腹腔注射和酒精灌胃复合因素制备大鼠肝纤维化模型，设正常组、模型组、苦碟子小剂量组（苦碟子注射液0.2ml/100g体重腹腔注射）、苦碟子中剂量组（苦碟子注射液0.4ml/100g体重腹腔注射）、苦碟子大剂量组（苦碟子注射液0.6ml/100g体重腹腔注射），治疗各组连续用药4周。治疗结束后各组检测血清肝功能指标、肝纤维化标志物（HA、LN、PCIII、IV-C）、肝组织HYP及脂质过氧化反应指标（SOD、MDA），采用免疫组化（SABC法）检测肝组织α-SMA表达，并对肝组织进行HE染色和VG染色，光镜观察肝组织纤维化程度。模型组大鼠血清ALT、AST、HA、LN、PCIII、IV-C和肝组织HYP、MDA含量较正常组明显升高，而肝组织SOD活性明显降低；苦碟子大剂量组、苦碟子中剂量组与模型组比较明显降低血清ALT、AST、HA、LN、PCIII、IV-C和肝组织HYP、MDA含量，提高肝组织SOD活性，肝组织细胞变性、胶原增生亦较模型组明显降低；模型组大鼠肝组织α-SMA明显增多，苦碟子大剂量组、苦碟子中剂量组可以明显降低α-SMA表达；苦碟子大剂量组、中剂量组与苦碟子小剂量组比较有明显差异。苦碟子可以降低肝纤维化大鼠血清ALT、AST、HA、LN、PCIII、IV-C和肝组织HYP、MDA含量，提高肝组织SOD活性，改善肝组织细胞变性、胶原增生，抑制HSC活化、增殖，因此对肝纤维化的治疗有确切的效果，且苦碟子大剂量和中剂量效果相当，但都优于苦碟子小剂量组，反映苦碟子对肝纤维化的治疗有一定的量效范围。苦碟子可能通过通过抗脂质过氧化反应，保护肝细胞；拮抗肝星状细胞的活化增殖；调控胶原纤维的代谢，减少细胞外基质合成分泌，抑制纤维组织增生等方面发挥对肝纤维化的治疗作用。

关键词

苦碟子；肝纤维化；实验研究

一、引言

肝纤维化是指由各种致病因子所致肝内结缔组织异常增生，导致肝内弥漫性细胞外基质过度沉淀的病理过程。它不是一个独立的疾病，而是许多慢性肝脏疾病均可引起的共同病理改变，是慢性肝病发展至肝硬化的必经阶段。肝纤维化的发病机制十分复杂，涉及多种细胞和细胞因子的相互作用。目前认为，肝星状细胞（HSC）的活化是肝纤维化发生发展的中心环节。正常情况下，HSC处于静止状态，当肝脏受到损伤时，HSC被激活，转化为肌成纤维细胞样细胞，大量增殖并分泌细胞外基质，如胶原蛋白、层粘连蛋白等，导致肝内纤维组织过度沉积，从而引起肝纤维化。

目前临床上用于治疗肝纤维化的药物种类有限，且存在诸多不足之处。例如，一些药物的疗效不够理想，无法有效逆转肝纤维化进程；部分药物具有较大的副作用，限制了其长期使用；还有一些药物的价格昂贵，给患者带来了沉重的经济负担。因此，寻找安全、有效的抗肝纤维化药物具有重要的临床意义。

苦碟子为菊科植物抱茎苦荬菜的全草，其性寒，味苦、辛，具有清热解毒、凉血、消痈排脓、祛瘀止痛等功效。在传统医学中，苦碟子常用于治疗阑尾炎、肠炎、痢疾、各种化脓性炎症、吐血、衄血、头痛、牙痛等病症。近年来，随着对苦碟子研究的不断深入，发现其在心血管系统、神经系统等方面具有多种药理活性。有研究报道，苦碟子具有抗氧化、抗炎、抗血小板聚集等作用，这些作用可能与苦碟子中含有的多种化学成分有关，如黄酮类、萜类、生物碱等。鉴于肝纤维化的发病机制与氧化应激、炎症反应等密切相关，推测苦碟子可能对肝纤维化具有一定的治疗作用，但目前相关研究较少，其作用机制尚不明确。因此，本研究旨在通过建立大鼠肝纤维化模型，观察苦碟子对肝纤维化的治疗作用，并探讨其可能的作用机制，为临床治疗肝纤维化提供新的思路和实验依据。

二、材料与方法

2.1实验动物

健康雄性SD大鼠，体重200±20g，购自[实验动物供应单位名称]。动物饲养于温度（22±2）℃、相对湿度（50±10）%的环境中，自由摄食和饮水，适应性饲养1周后进行实验。

2.2实验药物与试剂

苦碟子注射液，规格为2ml：10mg（原生药），由[生产厂家名称]生产；四氯化碳（CCL4），分析纯，购自[试剂公司名称]；无水乙醇，分析纯，购自[试剂公司名称]；橄榄油，购自[超市名称]；谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、白蛋白（Alb）、球蛋白（Glob）检测试剂盒，购自[试剂盒生产厂家名称]；透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、III型前胶原（PCIII）、IV型胶原（IV-C）检测试剂盒，购自[试剂盒生产厂家名称]；羟脯氨酸（HYP）检测试剂盒，购自[试剂盒生产厂家名称]；丙二醛（MDA）