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RNA干扰α-突触核蛋白：解锁多巴胺能神经元保护机制的新钥匙

一、引言

1.1研究背景与意义

帕金森病（Parkinson’sdisease，PD）作为一种常见的神经退行性疾病，严重威胁着人类的健康和生活质量。据统计，全球约有1000万PD患者，且发病率随着年龄的增长而显著增加，在60岁以上人群中发病率约为1%，85岁以上人群则上升至5%。PD的主要病理特征包括黑质多巴胺能神经元的进行性退变和死亡，以及细胞内异常聚集的α-突触核蛋白（α-synuclein，α-Syn）形成路易小体（Lewybody）和路易氏神经突（Lewyneurite）。这些病理变化导致大脑中多巴胺能神经传递受损，进而引发一系列运动症状，如静止性震颤、肢体僵硬、运动迟缓、姿势不稳定等，同时还伴有非运动症状，如嗅觉减退、睡眠障碍、抑郁、认知障碍等。

α-突触核蛋白是一种由140个氨基酸组成的可溶性蛋白质，主要存在于神经元的突触前末梢，在调节突触囊泡的运输、释放以及神经递质的传递等方面发挥着重要作用。在PD患者中，α-突触核蛋白发生异常折叠、寡聚化和聚集，形成具有神经毒性的纤维状聚集体，这些聚集体不仅会破坏多巴胺能神经元的正常结构和功能，还会激活小胶质细胞，引发神经炎症反应，进一步加剧神经元的损伤和死亡。研究表明，α-突触核蛋白的异常聚集与PD的发病机制密切相关，是PD病理进程中的关键事件。家族性帕金森病相关的α-突触核蛋白突变和α-突触核蛋白表达增加均可调节和促进α-突触核蛋白的寡聚化、纤维化和聚集过程。这些α-突触核蛋白纤维或聚集体可能会增加氧化应激并导致线粒体和突触功能障碍，从而导致帕金森病中的神经退行性病变。

多巴胺能神经元是大脑中产生和释放多巴胺的神经元，主要分布在中脑的黑质致密部（substantianigraparscompacta，SNc）和腹侧被盖区（ventraltegmentalarea，VTA）。多巴胺作为一种重要的神经递质，在调节运动控制、奖赏、动机、情绪、认知等方面发挥着至关重要的作用。在PD患者中，黑质多巴胺能神经元的大量死亡导致纹状体多巴胺水平显著降低，从而破坏了多巴胺能神经通路的正常功能，引发了PD的各种运动和非运动症状。黑质-纹状体通路中的多巴胺调控运动协调，其缺失导致帕金森病中的运动迟缓。

目前，PD的治疗主要以药物治疗为主，如左旋多巴（L-DOPA）、多巴胺受体激动剂等，这些药物虽然能够在一定程度上缓解PD的症状，但无法阻止疾病的进展，且长期使用会出现严重的副作用，如异动症、开关现象等。此外，还有深部脑刺激（deepbrainstimulation，DBS）等手术治疗方法，但也存在一定的局限性和风险。因此，深入研究PD的发病机制，寻找新的治疗靶点和治疗方法，对于改善PD患者的预后具有重要的意义。

RNA干扰（RNAinterference，RNAi）是一种由双链RNA（double-strandedRNA，dsRNA）介导的序列特异性基因沉默现象，能够高效、特异性地降解靶mRNA，从而抑制基因的表达。RNAi技术具有高度的特异性、高效性和可操作性，为研究基因功能和疾病治疗提供了一种强大的工具。在PD的研究中，RNAi技术可以通过沉默α-突触核蛋白基因的表达，减少α-突触核蛋白的异常聚集，从而保护多巴胺能神经元，为PD的治疗提供新的策略。已有研究表明，利用RNAi技术抑制α-突触核蛋白的表达，能够减轻PD模型动物的神经病理损伤和行为学异常。

本研究旨在探讨RNA干扰α-突触核蛋白对多巴胺能神经元的影响及其机制，通过构建α-突触核蛋白基因沉默的细胞模型和动物模型，观察RNAi对α-突触核蛋白表达、多巴胺能神经元存活和功能的影响，并进一步研究其作用机制，为PD的发病机制研究和治疗提供新的理论依据和实验基础。

1.2研究目的

本研究旨在深入探究RNA干扰α-突触核蛋白对多巴胺能神经元的影响及其潜在机制，为帕金森病的发病机制研究和治疗提供新的理论依据和实验基础，具体目标如下：

构建α-突触核蛋白基因沉默的细胞模型和动物模型：利用RNA干扰技术，构建α-突触核蛋白基因沉默的多巴胺能神经元细胞模型和帕金森病动物模型，为后续研究提供可靠的实验对象。通过转染小干扰RNA（smallinterferingRNA，siRNA）或短发夹RNA（shorthairpinRNA，shRNA）等方式，特异性地降低α-突触核蛋白基因的表达水平，观察细胞和动物模型中α-突触核蛋白的表达变化。

观察