固定组织切片检验医学操作流程.docxVIP

固定组织切片检验医学操作流程

一、固定组织切片检验医学操作流程概述

固定组织切片检验是医学诊断中不可或缺的环节，其目的是通过规范化的操作流程，确保组织样本在切片前保持原有形态和细胞结构，为后续的病理分析提供准确依据。本流程涵盖样本接收、固定、脱水、包埋、切片及染色等关键步骤，需严格遵循以避免人为误差。

二、操作流程

（一）样本接收与标识

1.接收样本时，核对样本标签与申请单信息，确保样本来源清晰、标识完整。

2.检查样本完整性，记录是否有渗血、坏死或其他异常情况。

3.标注样本接收时间，并立即置于4℃保存条件下。

（二）组织固定

1.选择合适的固定液：常用固定液为10%中性缓冲甲醛溶液（pH7.0-7.4）。

(1)对于新鲜组织，固定时间需≥24小时；

(2)对于坏死组织或小样本，固定时间可延长至48小时。

2.固定操作要点：

(1)将组织样本完全浸没于固定液中，避免气泡残留；

(2)放置于避光、恒温（4±2℃）环境中保存。

3.固定效果评估：固定后组织应呈现灰白色或淡黄色，质地脆硬。

（三）脱水与透明化

1.脱水步骤：

(1)依次使用梯度乙醇溶液脱水（如70%、85%、95%、100%），每次浸泡30分钟；

(2)最后使用无水乙醇（100%）脱水2次，每次30分钟。

2.透明化处理：

(1)将脱水后的组织置于二甲苯中透明，分2-3次处理，每次30分钟；

(2)确保组织透明度，无浑浊现象。

（四）包埋

1.选择合适的包埋剂：常用石蜡包埋剂，需预热至52-56℃。

2.操作步骤：

(1)将透明化后的组织置于模具中，加入适量石蜡；

(2)放置于包埋机上，冷却后形成固态包埋块。

3.包埋质量检查：确保包埋块表面光滑，无气泡。

（五）切片

1.设备准备：

(1)使用切片机，调整切片厚度（常用5μm）；

(2)预冷切片刀，保持刀刃锋利。

2.切片操作：

(1)将包埋块固定于切片机上，调整位置；

(2)分层切片，每张载玻片可切5-8张组织片；

(3)切片过程中避免移动包埋块，防止切片破碎。

3.切片后处理：

(1)立即收集组织片，置于70%乙醇中浸泡1分钟；

(2)转移至载玻片上，用滤纸吸除多余液体。

（六）染色与封片

1.染色步骤：

(1)常用HE染色法，包括苏木精染色（5-10分钟）和伊红染色（2-3分钟）；

(2)染色后依次使用梯度酒精脱水（95%、95%、100%），每次1分钟。

2.封片：

(1)滴加中性树胶封片剂，覆盖组织片；

(2)用镊子轻压载玻片，去除气泡；

(3)放置于避光环境下凝固。

三、质量控制

1.每步操作完成后进行质量检查，如固定液浓度、脱水梯度、切片厚度等。

2.定期校准切片机、染色设备，确保设备性能稳定。

3.保留操作记录，包括样本信息、各步骤参数及异常情况说明。

四、注意事项

1.操作过程中需佩戴口罩、手套，避免交叉污染。

2.固定时间不足可能导致组织结构变形，需严格监控。

3.切片时刀刃不锋利会导致组织撕裂，应定期更换切片刀。

一、固定组织切片检验医学操作流程概述

固定组织切片检验是医学诊断中不可或缺的环节，其目的是通过规范化的操作流程，确保组织样本在切片前保持原有形态和细胞结构，为后续的病理分析提供准确依据。本流程涵盖样本接收、固定、脱水、包埋、切片及染色等关键步骤，需严格遵循以避免人为误差。

二、操作流程

（一）样本接收与标识

1.接收样本时，核对样本标签与申请单信息，确保样本来源清晰、标识完整。

-核对内容应包括：样本编号、患者信息（姓名、性别等）、采集部位、采集时间等。

-标签信息错误或缺失的样本，应立即联系样本提供方确认或拒收，并记录原因。

2.检查样本完整性，记录是否有渗血、坏死或其他异常情况。

-完整性检查要点：观察样本是否有破损、变形或污染。

-异常情况记录：详细描述渗血量、坏死范围、污染程度等，并拍照存档（如条件允许）。

3.标注样本接收时间，并立即置于4℃保存条件下。

-时间标注格式：年-月-日时:分（如2023-10-2714:30）。

-保存条件：使用专用样本冰箱，温度控制在4±2℃，避免反复冻融。

（二）组织固定

1.选择合适的固定液：常用固定液为10%中性缓冲甲醛溶液（pH7.0-7.4）。

-固定液配制：使用分析纯甲醛原液，与0.1M磷酸盐缓冲液（pH7.4）按体积比1:9混合。

-替代固定液：对于特殊样本（如神经组织），可使用Bouins液或Zenkers液，需根据具体需求选择。

2.固定操作要点：

(1)将组织样本完全浸没于固定液中，避免气泡残留。

-操作方法：使用镊子将组织块轻轻放入固定液中，可通过缓慢倾倒或轻敲容器边缘消除气泡。

(2)放置