十字花科蔬菜中萝卜硫素的测定-高效液相色谱法.docxVIP

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FORMTEXT43

FORMTEXT湖南省地方标准

DBFORMTEXT43/TFORMTEXTXXXX—FORMTEXT2025

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FORMTEXT十字花科蔬菜中萝卜硫素的测定

高效液相色谱法

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FORMTEXT2025-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX发布

FORMTEXT2025-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX实施

FORMTEXT湖南省市场监督管理局??发布

STYLEREF标准文件_文件编号DB43/TXXXX—2025

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STYLEREF标准文件_文件编号DB43/TXXXX—2025

目次

TOC\o1-1\h\t标准文件_一级条标题,2,标准文件_附录一级条标题,2,前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4试剂 1

5仪器与设备 1

6试样制备 1

7操作步骤 1

7.1称样 1

7.2萝卜硫素提取 2

7.3标准品制备 2

7.4色谱条件 2

7.5色谱测定 2

8结果计算 2

8.1标准曲线绘制 3

8.2鲜样中萝卜硫素含量计算 3

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由湖南省农业农村厅提出。

本文件由湖南省农业标准化技术委员会归口。

本文件起草单位：湖南农业大学。

本文件主要起草人：黄科。

十字花科蔬菜中萝卜硫素的测定高效液相色谱法

范围

本文件规定了十字花科蔬菜中萝卜硫素含量测定的试剂、仪器与设备、试样制备、操作步骤、结果计算方法等要求。

本文件适用于十字花科蔬菜萝卜硫素含量的测定与分析。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T28728-2012危险化学品实验室安全操作规程

GB/T6682实验室用水标准

术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

试剂

去离子水：符合GB／T6682标准二级的规定；

萝卜硫素标准品（苄基芥子油苷，Glucotropaeolinpotassiumsalt，GC≥98%，PhytoLab）；

分析纯二氯甲烷（国药）；

无水硫酸钠（国药）；

色谱级乙腈（≥99.9%(GC),gradientgrade,suitableforHPLC,Reag.PhEur,LiChrosolv?）；

流动相A：去离子水，超声波脱气30s；流动相B：色谱级乙腈，超声波脱气30s。

仪器与设备

实验室常用仪器设备：研钵或微型研磨机；旋转蒸发仪（中天科技，RE-2000B）；恒温水浴锅（荣华）；恒温摇床（上海苏坤，SKY-2102C）；色谱柱C18柱（Agilent），250mm×4.6mm，5μm；高效液相色谱仪（Agilent）：DAD紫外检测器。

试样制备

十字花科蔬菜不同组织部位（若需分部位检测，需单独取样，如：叶片、根部、花球、种子等）的鲜样或者保存于-80℃超低温冰箱的液氮速冻样品。

操作步骤

称样

将样品经液氮速冻后研磨成粉状，分别称取2g粉状待测试样至A、B、C三个50mL玻璃锥形瓶中。

萝卜硫素提取

提取萝卜硫素时应：

在锥形瓶中加入4mL去离子水，将锥形瓶用封口膜封口，置于沸水浴中3-5分钟；（目的是使在样品匀浆中释放出的降解萝卜硫苷产生萝卜硫素的葡萄糖硫苷酶失活。）

之后将锥形瓶放入25℃恒温水浴锅中，静置水解4h；

在锥形瓶中加入15mL二氯甲烷于28℃恒温摇床中摇晃10min，摇速200rpm；

120mm玻璃漏斗中放入滤纸，加5g无水硫酸钠干燥，将混合溶剂进行过