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2025(生物技术专业)基因工程制药技术真题及答案

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.基因工程中常用的限制性内切酶是（）

A.Ⅰ型酶

B.Ⅱ型酶

C.Ⅲ型酶

D.Ⅳ型酶

答案：B

解析：Ⅱ型限制性内切酶能识别特定的核苷酸序列并在特定的位点切割DNA，切割位点具有高度特异性，是基因工程中最常用的工具酶。Ⅰ型酶和Ⅲ型酶切割位点不固定，Ⅳ型酶主要作用于修饰的DNA，一般不用于基因工程操作。

2.下列哪种载体可以容纳最大的外源DNA片段（）

A.质粒载体

B.噬菌体载体

C.黏粒载体

D.酵母人工染色体（YAC）

答案：D

解析：质粒载体一般能容纳的外源DNA片段较小，通常在几kb以内；噬菌体载体可容纳10-20kb的外源DNA片段；黏粒载体能容纳30-45kb的外源DNA片段；而酵母人工染色体（YAC）可以容纳长达几百kb甚至超过1Mb的外源DNA片段。

3.基因工程中常用的连接酶是（）

A.T4DNA连接酶

B.大肠杆菌DNA连接酶

C.RNA连接酶

D.逆转录酶

答案：A

解析：T4DNA连接酶能催化双链DNA片段相邻的5-磷酸和3-羟基之间形成磷酸二酯键，可连接黏性末端和平末端，是基因工程中最常用的连接酶。大肠杆菌DNA连接酶只能连接黏性末端，应用范围相对较窄。RNA连接酶主要用于RNA分子的连接，逆转录酶用于以RNA为模板合成DNA，它们都不是用于DNA片段连接的主要酶。

4.下列哪种方法可用于检测重组体中是否含有目的基因（）

A.核酸分子杂交

B.蛋白质印迹法

C.酶联免疫吸附测定（ELISA）

D.流式细胞术

答案：A

解析：核酸分子杂交是根据碱基互补配对原则，用标记的核酸探针与重组体中的DNA或RNA进行杂交，可检测重组体中是否含有目的基因。蛋白质印迹法主要用于检测蛋白质；酶联免疫吸附测定（ELISA）也是用于检测蛋白质或抗原；流式细胞术主要用于对细胞进行分析和分选，一般不用于检测重组体中的目的基因。

5.基因工程制药中，常用的宿主细胞不包括（）

A.大肠杆菌

B.酵母菌

C.昆虫细胞

D.植物细胞

答案：D

解析：在基因工程制药中，大肠杆菌是最常用的原核宿主细胞，具有生长迅速、易于培养等优点；酵母菌是常用的真核宿主细胞，能对蛋白质进行一定的修饰；昆虫细胞也广泛应用于重组蛋白的表达。植物细胞虽然也可用于基因工程，但在基因工程制药中不是常用的宿主细胞，主要是因为植物细胞培养相对复杂，表达水平和产物纯化等方面存在一定困难。

6.下列关于基因治疗的描述，错误的是（）

A.基因治疗是将正常基因导入患者细胞以纠正或补偿基因缺陷

B.基因治疗可分为体细胞基因治疗和生殖细胞基因治疗

C.目前基因治疗主要采用病毒载体

D.基因治疗已经完全成熟，可广泛应用于临床

答案：D

解析：基因治疗是将正常基因导入患者细胞，以纠正或补偿基因缺陷，从而达到治疗疾病的目的，A选项正确。基因治疗可分为体细胞基因治疗和生殖细胞基因治疗，体细胞基因治疗是针对患者的体细胞进行操作，生殖细胞基因治疗则是对生殖细胞进行基因修饰，B选项正确。目前基因治疗主要采用病毒载体，如腺病毒载体、逆转录病毒载体等，因为病毒载体具有较高的转染效率，C选项正确。但基因治疗目前还存在许多问题，如载体的安全性、基因表达的调控等，尚未完全成熟，不能广泛应用于临床，D选项错误。

7.构建cDNA文库时，首先需要提取（）

A.基因组DNA

B.线粒体DNA

C.总RNA

D.信使RNA（mRNA）

答案：D

解析：cDNA文库是指某一组织或细胞在一定条件下所表达的全部mRNA经逆转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。所以构建cDNA文库时，首先需要提取信使RNA（mRNA），然后以mRNA为模板合成cDNA。基因组DNA用于构建基因组文库；线粒体DNA主要用于线粒体相关基因的研究；总RNA包含了mRNA、tRNA、rRNA等多种RNA，构建cDNA文库需要的是其中的mRNA。

8.下列哪种技术可用于蛋白质的分离纯化（）

A.聚合酶链式反应（PCR）

B.凝胶过滤层析

C.核酸测序

D.基因芯片技术

答案：B

解析：凝胶过滤层析是根据蛋白质分子大小不同进行分离纯化的一种方法，大分子蛋白质不能进入凝胶颗粒内部，先被洗脱出来，小分子蛋白质则后被洗脱出来。聚合酶链式反应（PCR）用于扩增DNA片段；核酸测序用于测定核酸的碱基序列；基因芯片技术主要用于基因表达分析和基因突变检测等，它们都不