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盐析法纯化血清中IgG类抗体
实验目的
掌握盐析法提取血清免疫球蛋白IgG抗体的原理
熟悉血清IgG提取纯化操作过程和方法
二、实验原理
蛋白质在不同浓度的盐溶液中相对溶解度不同,它在一定浓度的中性盐溶液中易于沉淀,而其他蛋白质组分在此时不易沉淀,通过离心可将两者分离。
透析法脱盐:
透析是将含有小分子杂质的蛋白质溶液装在半透膜(玻璃纸、火绵纸等)制的透析袋里放在透析缓冲液中进行,可不断更换缓冲液,直至杂质被除去
四、操作步骤
五、结果判断
分别测OD280和OD260处的光密度值,按照公式计算
蛋白质浓度(mg/ml)=1.45OD280—0.74OD260
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