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（优选）细胞培养实验指导大全现在是2页\一共有32页\编辑于星期三

CO2培养箱使用注意事项WenzhouMedicalCollege一、二氧化碳进气压力：0.08~0.1MPa(0.8-1bar)压力表选用：初级压力25MPa，次级压力0.2MPa。松→紧压力低→高。进气正常的现象。压力过高的危害，注意安全。压力调节稳定需要时间，原因：残余气体，压力表不稳。。二、温度控制培养箱的最低工作温度一般是高于室温5°C，空气循环提高温度均一性。温度恢复时间（37℃），开门时间过长，超温；水盘的水温影响。门加热系统，即使箱内相对湿度高达98%，所有内壁表面亦能保持完全干燥。▼现在是3页\一共有32页\编辑于星期三

CO2培养箱使用注意事项WenzhouMedicalCollege现在是4页\一共有32页\编辑于星期三

CO2培养箱使用注意事项WenzhouMedicalCollege现在是5页\一共有32页\编辑于星期三

CO2培养箱使用注意事项WenzhouMedicalCollege▲幻灯片3现在是6页\一共有32页\编辑于星期三

CO2培养箱使用注意事项WenzhouMedicalCollege三、二氧化碳浓度控制按培养基中的NaHCO3设定二氧化碳浓度：NaHCO31.97g/L，CO2浓度5%；NaHCO33.95g/L，CO210%。RPMI1640培养基每升2.1g碳酸氢钠；DMEM每升3.7克碳酸氢钠；F12NaHCO31.18g/L;DMEM/F12NaHCO32.56g/L。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠（0.34g/L）共用，以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下，细胞培养瓶的盖子应拧紧，以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。注意现在是7页\一共有32页\编辑于星期三

CO2培养箱使用注意事项WenzhouMedicalCollege四、相对湿度水盘蒸发面积大，增强蒸发作用，使培养箱内能快速达到饱和湿度状态。无菌蒸馏水，定期检查、定期更换。二氧化碳培养箱停止使用时，除水，否则发霉。现在是8页\一共有32页\编辑于星期三

CO2培养箱使用注意事项WenzhouMedicalCollege五、防污染和消毒灭菌空气过滤：HEPA过滤器能过滤培养箱内空气，可过滤除去99.97%的0.3微米以上的颗粒，箱体关闭后5分钟内达到空气100级。乙醇消毒。紫外消毒：紫外消毒能力是与紫外灯距离目标的距离的二次方成反比，距离越远，消毒能力越差，且无穿透能力，难以达到彻底灭菌的要求；高温湿热：目前比较有效消毒灭菌的方法，高温消毒又分为两类，一是传统的高温干热消毒，另一种是先进的高温湿热灭菌。现在是9页\一共有32页\编辑于星期三

CO2培养箱使用注意事项WenzhouMedicalCollege六、重要提示需要定时更换的部件：HEPA过滤器、空气过滤器需要定时处理的工作：消毒、水盘现在是10页\一共有32页\编辑于星期三

CO2培养箱使用注意事项WenzhouMedicalCollege▲幻灯片3现在是11页\一共有32页\编辑于星期三

细胞培养室WenzhouMedicalCollegeBiotechnologyResearchPlatform现在是12页\一共有32页\编辑于星期三

细胞培养室WenzhouMedicalCollege无菌级别：万级，局部100级Nikon倒置生物显微镜NikonDS-5M-L1显微摄影系统Thermo二氧化碳培养箱LabsystemsBioMate电动移液器现在是13页\一共有32页\编辑于星期三

细胞培养室使用注意事项WenzhouMedicalCollege细胞培养室的大小依需要而定，一般由更衣间、缓冲间和操作间三部分组成。更衣间放在外，主要供更换衣帽、鞋子等。缓冲间位于更衣间与操作间之间，也可同时和几个操作间相通。操作间放在内间，主要供无菌操作和细胞培养，房间应不受日光直射，大小适当，高度适宜(2.5m)。房间过大，清扫和消毒不便；过小，操作不便；顶部过高会影响紫外线的有效灭菌效果。墙壁应光滑无死角，以便清洗和消毒。