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蛋白质的盐析与变性对比实验考试答案
单项选择题(每题2分,共10题)
1.蛋白质盐析常用的盐是()
A.氯化钠B.硫酸铜C.硝酸银D.氯化钡
答案:A
2.盐析引起蛋白质沉淀的原因是()
A.破坏水化膜B.改变等电点C.增加电荷D.降低溶解度
答案:A
3.蛋白质变性后,其()
A.一级结构改变B.溶解度增加C.生物学活性丧失D.不易被蛋白酶水解
答案:C
4.能使蛋白质变性的因素是()
A.低温B.中性盐C.加热D.透析
答案:C
5.盐析得到的蛋白质沉淀()
A.不能再溶解B.加水可溶解C.变性不可逆D.失去活性
答案:B
6.重金属盐使蛋白质变性的主要原因是()
A.破坏水化膜B.与蛋白质结合成不溶性盐C.调节pHD.改变溶解度
答案:B
7.蛋白质变性不涉及()
A.二硫键断裂B.肽键断裂C.空间结构破坏D.理化性质改变
答案:B
8.下列哪种物质不会使蛋白质变性()
A.酒精B.丙酮C.硫酸铵D.甲醛
答案:C
9.盐析法沉淀蛋白质的原理是()
A.中和电荷,破坏水化膜B.降低蛋白质溶液的介电常数C.调节蛋白质溶液的等电点D.使蛋白质变性沉淀
答案:A
10.蛋白质变性后表现为()
A.粘度下降B.易结晶C.溶解度降低D.紫外吸收降低
答案:C
多项选择题(每题2分,共10题)
1.蛋白质盐析的特点有()
A.可逆B.不变性C.改变蛋白质结构D.常用中性盐E.降低蛋白质溶解度
答案:ABDE
2.能使蛋白质变性的物理因素有()
A.加热B.紫外线C.超声波D.高压E.低温
答案:ABCD
3.蛋白质变性后会发生()
A.生物学活性丧失B.溶解度降低C.易被蛋白酶水解D.空间结构改变E.一级结构破坏
答案:ABCD
4.以下属于蛋白质变性化学因素的是()
A.强酸B.强碱C.重金属盐D.生物碱试剂E.有机溶剂
答案:ABCDE
5.盐析常用的盐类有()
A.硫酸铵B.硫酸钠C.氯化钠D.氯化铵E.硝酸钾
答案:ABCD
6.蛋白质变性与盐析的区别在于()
A.变性不可逆,盐析可逆B.变性改变结构,盐析不改变C.变性失活,盐析不失活D.变性影响溶解度,盐析不影响E.变性常用化学物理因素,盐析用中性盐
答案:ABCE
7.下列关于蛋白质盐析说法正确的是()
A.可用于蛋白质分离纯化B.不同蛋白质盐析所需盐浓度不同C.盐析沉淀的蛋白质活性不变D.盐析是因为破坏蛋白质水化膜E.盐析后蛋白质易结晶
答案:ABCD
8.蛋白质变性可能导致()
A.旋光性改变B.颜色反应改变C.失去原有的功能D.沉淀E.粘度增加
答案:ABCDE
9.能使蛋白质变性的有机溶剂有()
A.乙醇B.甲醇C.丙酮D.乙醚E.氯仿
答案:ABC
10.蛋白质盐析实验中可能用到的仪器有()
A.试管B.滴管C.离心机D.天平E.酸度计
答案:ABCD
判断题(每题2分,共10题)
1.蛋白质盐析是不可逆的过程。(×)
2.只要加热,蛋白质一定会变性。(×)
3.蛋白质变性后溶解度一定会降低。(√)
4.盐析沉淀的蛋白质加水一定能溶解。(√)
5.重金属盐使蛋白质变性是因为破坏了蛋白质的一级结构。(×)
6.蛋白质变性和盐析都能使蛋白质沉淀,原理相同。(×)
7.低温不会使蛋白质变性。(√)
8.蛋白质盐析实验中,盐浓度越高越好。(×)
9.变性的蛋白质一定不能恢复活性。(×)
10.盐析法可用于粗提蛋白质。(√)
简答题(每题5分,共4题)
1.简述蛋白质盐析的原理
答案:蛋白质在水溶液中的溶解度取决于蛋白质分子表面电荷和水化膜。中性盐的加入,中和蛋白质表面电荷,破坏水化膜,使蛋白质溶解度降低而沉淀。但不改变蛋白质的空间结构和活性,加水可溶解,是可逆过程。
2.列举三种使蛋白质变性的化学因素及原理
答案:强酸、强碱:改变蛋白质的酸碱环境,破坏离子键和氢键;重金属盐:与蛋白质的巯基等基团结合,改变蛋白质结构;有机溶剂:破坏蛋白质的水化膜和疏水相互作用。
3.蛋白质变性后有哪些主要表现
答案:生物学活性丧失,如酶失去催化活性;溶解度降低,易发生沉淀;易被蛋白酶水解,因为空间结构改变使肽键暴露;理化性质改变,如旋光性、粘度变化等。
4.比较蛋白质盐析和变性在应用上的差异
答案:盐析常用于蛋白质的粗分离和纯化,可保持蛋白质活性;变性在消毒灭菌、制备蛋白质水解产物等方面应用,如高温消毒使细菌蛋白质变性失活,利用蛋白质变性制备氨基酸等。
讨论题(每题5分,共4题)
1.在实际科研中,如何选择合适的方法使蛋白质沉淀,是盐析还是变性?
答案:若要保留蛋白质活性用于后续实验,如酶的分离纯化、抗体保存等,应选择盐析。它可逆且不破坏结构功能。若不需要蛋白质活性,如去除样品中蛋白质杂质、消毒杀菌等,则可采用变性方法,如加热、使用化学试剂等使蛋白质结构破坏、活性丧失。
2.蛋白质变性
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