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PCR岗位技能考核试题（2024）

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检验科

实习生

1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是（）

A.目的基因

B.引物

C.四种脱氧核苷酸

D.DNA聚合酶等

E.mRNA

F.核糖体

2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为（）

A、0.3-1mmol/L

B、0.5-1mmol/L

C、0.3-2mmol/L

D、0.5-2mmol/L

3、多重PCR需要的引物对为（）

A、一对引物

B、半对引物

C、两对引物

D、多对引物

4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为（）

A、模板

B、引物

C、dNTP

D、镁离子

5、在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增（）

A、TaqDNA聚合酶加量过多

B、引物加量过多

C、A、B都可

D、缓冲液中镁离子含量过高

6.PCR技术的发明人是（）

Mullis

史蒂文.沙夫

兰德尔.才木

7.PCR产物短期存放可在（）保存。

4℃

常温

-80℃

高温

8.PCR产物长期储存最好置于（）。

A、4℃

常温

-20℃

9.PCR的基本反应过程包括（）

变性、退火、延伸

变性、延伸

变性、退火

10.在实际工作中，基因扩增实验室污染类型包括（）

A.试剂污染和标本间交叉污染

B.扩增产物的污染

C.天然基因组DNA的污染

D.A、B、C都可能

11、PCR技术于哪一年发明（）

1983年

1971年

1987年

1993年

12.TaqDNA聚合酶酶促反应最快最适温度为（）

A、37℃

B、50-55℃

C、70-75℃

D、80-85℃

13.以下哪种物质在PCR反应中不需要（）

TaqDNA聚合酶

dNTPs

镁离子

RNA酶

14.PCR检测中，经过n个循环的扩增，拷贝数将增加（）

n

2n

2^n

n^2

15.PCR基因扩增仪最关键的部分是（）

温度控制系统

荧光检测系统

软件系统

热盖

16.以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则（）

各区合并

注意风向

因地制宜

方便工作

17.PCR实验室一般包括（）

A.试剂准备区

B.标本制备区

C.扩增区和产物分析区

D.A、B、C都含

18.PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（）。

白细胞DNA

病毒蛋白质

血浆抗体

病毒核酸

19.如果反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后，DNA分子的数量将达到（）个。

A、100×30

B、100×30×2

C、100×30^2

D、100×2^30

20.PCR扩增产物的分析方法主要有（）

A、凝胶电泳分析法

B、点杂交法

C、荧光探针定量PCR法

D、A、B、C都是

21、阳性室内质控品出现假阴性失控的常见原因分析（）

A、核酸提取中的随机误差，如核酸提取中的丢失，有机溶剂的去除不彻底，标本中扩增抑制物的残留，所用耗材如离心管有PCR抑制物等。

B、仪器的问题，如扩增仪孔间温度的不一致性，孔内温度与所示温度的不一致性等。

C、试剂的问题，如Taq酶和/或反转录酶的失活，探针的纯度及标记效率和核酸提取试剂的效率等。

22.阴性室内质控品出现假阳性失控的常见原因分析（）

A、扩增产物的污染

B、临床标本的核酸提取过程中发生的样本间的交叉污染。

C、移液枪头等关键耗材污染

D、试剂污染

E、仪器故障

23.出现实验室污染怎么办?（）

A、开窗通风

B、用次氯酸钠溶液清洗地面，实验台、墙面

C、增加紫外灯照射时间

D、用核酸清除剂空中喷雾等方法去除

E、每天进行上述过程，直到污染消除。

24.生物安全柜、超净工作台、通风柜的区别（）[多选题]

A.生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护工作人员、实验室环境以及实验品,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。

B.超净工作台是为了保护试验品或产品而设计的通过吹过工作区域的垂直或水平层流空气防止试验品或产品受到工作区域外粉尘或细菌的污染。一旦微生物样品放置于工作区域,层流空气将把带有微生物介质的空气吹向前台工作人员而产生危险。

C.通风柜是为在化学实验过程中清除腐蚀性化学气体和有毒烟雾而设计的。分为外接管道通风柜和净气型通风柜，净气型通风柜主要用于保护实验室人员免受有毒化学气体和烟雾吸入危害,也可用于防止粉末吸入危害

D.