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2.原核生物tRNA的加工原核的tRNA初始转录本多为多顺反子(polycistron),。少数的tRNA前体为单顺反子(monocistron)。第30页,共71页,星期日,2025年,2月5日tRNA的加工
分成3个阶段(1)“斩头”,形成5′末端。RNaseP具有内切酶的活性,可切除E.coli前体tRNA5′端的前导序列(41nt)。(2)去尾,形成3′-OH末端。此过程由内切酶和外切酶的共同参与。图13-1三种tRNA前体的剪切第31页,共71页,星期日,2025年,2月5日图13-3tRNA前体特殊碱基(3)修饰:在前体tRNA的一些专一部位的碱基需要通过甲基化酶,硫醇酶,假尿嘧啶核苷化酶等的作用进行修饰成为特殊的碱基第32页,共71页,星期日,2025年,2月5日3.原核生物rRNA的加工在E.coli中rRNA有7个转录单位,名为rrnA-G,它们在染色体上并不紧密连锁。rRNA序列是保守的,每个转录单位都含有16S、23S、5SRNA及一个或几个tRNA。第33页,共71页,星期日,2025年,2月5日3.原核生物rRNA的加工rRNA前体的加工是由RNaseⅢ负责的。图13-4原核生物rRNA的加工(转引自Russell,1992)第34页,共71页,星期日,2025年,2月5日4.5真核生物RNA的合成3.5.1真核生物的RNA聚合酶RNA聚合酶I:基本不受α-鹅膏蕈碱的抑制,在大于10-3mol/L时才表现出轻微的抑制作用。此酶存在于核仁中,其功能是合成5.8SrRNA,18SrRNA,28SrRNA。第35页,共71页,星期日,2025年,2月5日4.5.1真核生物的RNA聚合酶RNA聚合酶II:对α-鹅膏蕈碱最为敏感,在10-9mol/L~10-8mol/L浓度下被就会被抑制。此酶核质中,其功能是合成mRNA和snRNA。第36页,共71页,星期日,2025年,2月5日4.5.1真核生物的RNA聚合酶RNA聚合酶III:对α-鹅膏蕈碱的敏感性介于两者之间,在10-5mol/L~10-4mol/L时表现出抑制作用。此酶也存在于核质中,其功能是合成tRNA和5SrRNA及转录Alu序列。第37页,共71页,星期日,2025年,2月5日4.5.2真核生物的启动子启动子(promoter):RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列。第38页,共71页,星期日,2025年,2月5日4.5.2真核生物的启动子RNA聚合酶I是转录rRNA的,其启动子可分两部分:-40~+5称近启动子,其功能是决定转录起始的精确位置。-165~-40称远启动子,其功能是影响转录的频率。第39页,共71页,星期日,2025年,2月5日4.5.2真核生物的启动子2.RNA聚合酶II的启动子第一个部位为帽子位点,即转录的起始位点。其碱基大多为A(指非模板链)两侧各有若干个嘧啶核苷酸。该序列对启动子的强度和确定起始位点方面都是必要的。第40页,共71页,星期日,2025年,2月5日第二个部位为TATA框又称Hogness框或(Goldberg-Hongness)框。处于转录起始位点上游-30~-25区。TATA盒的作用在于决定转录的起点,序列的改变会使转录位点偏移;缺失TATA盒,转录将在许多位点上开始。TATA盒决定转录的效率.第41页,共71页,星期日,2025年,2月5日第三个部位为CAAT框起始位点上游-50、-75、-100左右都存在与基因转录起始有关的序列,其中-75区附近的CAAT框较为普遍。影响着转录活化和频率。第42页,共71页,星期日,2025年,2月5日第四个部位是增强子在真核生物中,有些基因的启动子远上游区域(-100bp以上)可大大增强启动子的活性,这种序列称为增强子(enhancer)。第43页,共71页,星期日,2025年,2月5日4.5.2真核生物的启动子3.RNA聚合酶Ⅲ的启动子一般说,启动子均位于转录起点的上游位于起始位点的下游,所以叫内启动子。第44页,共71页,星期日,2025年,2月5日4.5.3真核生物转录后的加工真核生物mRNA前体称为hnRNA。由hnRNA加工为成熟的mRNA,经历以下过程:第45页,共71页,星期日,2025年,2月5日1.mRNA转录后加工①5′端形成特殊的帽子结构,
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