高效液相色谱法 (4).pptVIP

*第1页，共39页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱法的主要类型和原理高效液相色谱法的固定相和流动相及其选择高效液相色谱仪高效液相色谱分析方法Introduction*第2页，共39页，星期日，2025年，2月5日HPLC以高压输送流动相，采用高效固定相及高灵敏度检测器，发展而成的现代液相色谱分析方法*第3页，共39页，星期日，2025年，2月5日应用颗粒细、规则均匀的固定相，传质阻抗小，柱效高，分离效率高流速快，分析速度快使用高灵敏度检测器，大大提高了灵敏度与经典液相色谱法相比*第4页，共39页，星期日，2025年，2月5日不受试样的挥发性和热稳定性的限制，应用范围广可选用不同性质的各种溶剂作为流动相，分离选择性高一般在室温条件下进行分离，不需要高柱温与气相色谱法相比*第5页，共39页，星期日，2025年，2月5日70年代迅速发展不挥发有机物约占70%80年代以来HPLC文献量21%（89年）仪器销售量25%（12亿）（89年）应用领域拓展（化工、环保、临床、药品、生命）超过GC*第6页，共39页，星期日，2025年，2月5日*第7页，共39页，星期日，2025年，2月5日*第8页，共39页，星期日，2025年，2月5日*第9页，共39页，星期日，2025年，2月5日*第10页，共39页，星期日，2025年，2月5日*第11页，共39页，星期日，2025年，2月5日一、高效液相色谱法的主要类型和原理*第12页，共39页，星期日，2025年，2月5日1.高效液相色谱法的主要类型按固定相的聚集状态分类液液色谱法（LLC）液固色谱法（LSC）按分离机制分类分配色谱法（partitionchromatography）吸附色谱法（adsorptionchromatography）离子交换色谱法（ionexchangechromatography;IEC）分子排阻色谱（molecularexclusionchromatography;MEC）*第13页，共39页，星期日，2025年，2月5日按分离机制分类（续）亲和色谱法（affinitychromatography;AC）手性色谱法（chiralchromatography;CC）胶束色谱法（micellarchromatography;MC）电色谱法（electrochromatography;EC）最常见的HPLC化学键合相色谱法（bondedphasechromatography;BPC）离子抑制色谱法（ionsupressionchromatography;ISC）离子对色谱法（pairedionchromatography;PICorIPC）*第14页，共39页，星期日，2025年，2月5日化学键合相色谱法：以化学键合相为固定相的色谱法。2.化学键合相色谱法bondedphasechromatography(BPC)化学键合相：通过化学反应将有机基团键合在载体表面构成的固定相。*第15页，共39页，星期日，2025年，2月5日固定相：氰基化学键合相：与硅胶相似氨基化学键合相：分析糖类流动相：非极性或弱极性溶剂。正己烷，氯仿等。极性：固定相流动相 正相键合相色谱法normalphase-bondedphasechromatography主要用于分离溶于有机溶剂的极性至中等极性的分子型化合物*第16页，共39页，星期日，2025年，2月5日分离机制：分配过程吸附过程（诱导、氢键和定向作用等）组分的出峰顺序：极性小的先出峰，极性大的后出峰。*第17页，共39页，星期日，2025年，2月5日流动相的极性与容量因子的关系：流动相的极性增大，洗脱能力增大，溶质的k减小，tR减小。*第18页，共39页，星期日，2025年，2月5日固定相：十八烷基键合相（C18或ODS）流动相：甲醇-水或乙腈-水极性：固定相流动相 (2)反相键合相色谱法reversedphase-bondedphasechromatography分离机制：复杂组分的出峰顺序：