光叶楮组织培养再生体系构建及关键技术探究.docxVIP

光叶楮组织培养再生体系构建及关键技术探究

一、引言

1.1研究背景与意义

光叶楮（Broussonetiapapyrifera），又名构树，为桑科（Moraceae）构属（Broussonetia）多年生落叶乔木。作为一种具有突出抗逆性的速生丰产树种，光叶楮喜光、耐干旱、耐瘠薄、耐盐碱，在丘陵、河滩等瘠薄土地均能生长，而且其生长速度特别快，一年能成材，连年可采伐，具有很高的经济价值和生态价值。

在经济价值方面，光叶楮浑身是宝。其树皮是最高等级天然韧皮纤维，是高级纸浆、纺织纤维原材料，价值高，市场需求量大。相关研究表明，光叶楮韧皮纤维平均长度为7.48mm，比国内同属树种高23%，成浆率80%以上，原浆不经漂白，白度达85%以上，用水量是草浆的1/5，干杆纸浆根据不同工艺可制多种木浆，是制造用纸（新闻纸、宣纸、造币纸）的优质原料，各地均长期收购野生树皮与枝条，也向日本出口构树枝条。其树叶蛋白质含量高，根据测定，光叶楮树叶粗蛋白含量为23.48%（为麸皮的两倍），并含有铜、铁、锌、锰等微量元素，可以直接作为家畜饲料也可以作为复配全价饲料的原料，农户利用荒山荒地种植，可以自采树叶喂猪、牛、羊，出售树皮、树干还可增加收入。其树杆是普通纸浆、人造板材的原料，是国内紧缺物资，近年价格连年上涨。此外，光叶楮嫩芽还能当做保健食品，树皮、浆汁、果、根皮及叶均可入药，具有清热、解毒、益肝肾、强壮筋骨和消炎之功能。

在生态价值方面，光叶楮侧根极其发达，多集中于地表30cm，当年侧根伸展2m以上，其发达的地表根系网络足以抵制地表径流、治理水土流失及阻止土地沙化，耐干旱、抗盐碱、生长迅速的特点，能迅速绿化荒山、荒坡、荒地、荒滩和盐碱地，形成产业，发展生态恢复高效光合生产力。

然而，目前光叶楮苗木主要靠常规的无性扦插繁殖，但由于材料来源不足，扦插成活率不高，费时费工，难以满足当前大面积栽培及推广的需要。而传统的种子繁殖方式容易导致品种退化，无法保证光叶楮优良性状的稳定遗传。因此，建立高效的光叶楮组织培养再生体系具有重要的现实意义。通过组织培养技术，可以快速、大量地繁殖光叶楮优良种苗，满足市场对光叶楮苗木的需求，推动光叶楮产业的发展。同时，组织培养技术还可以用于光叶楮的品种改良和种质创新，为光叶楮产业的可持续发展提供技术支持。

1.2光叶楮研究现状

在光叶楮组织培养再生体系建立的研究中，外植体选择是关键的第一步。众多学者对此进行了广泛探索，李际红等人以光叶楮母株茎段作为外植体，发现采用母株基部的茎段作外植体诱导率高，分化增殖系数大；刘中兵和杨祖达则尝试以光叶楮的根段为外植体，探索其试管苗体系的建立。

在培养基配方研究上，也取得了丰富成果。例如，朱永钊等人开展光叶楮外植体消毒、侧芽诱导、继代增殖和生根诱导试验，得出以75％乙醇+0.15％升汞消毒外植体，干净外植体获得率达40％；采用MS+6-BA2.0mg／L+NAA0.5mg／L培养基，侧芽诱导分化率达80％；采用MS+6-BA1.0mg／L+NAA0.5mg／L继代培养，增殖倍数达3.96倍；采用1／2MS+IBA1.0mg／L或GGR60.5-1.0mg／L进行生根培养，瓶苗生根率达100％，形成了可以产业化的光叶楮组织培养技术流程。曹帮华等研究表明MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L为最佳增殖培养基，繁殖系数为3.4，平均芽高为4.0cm，且生长快、芽苗质量高；1/2MS+NAA0.3mg/L为最佳生根培养基，生根率为72%，根系质量好。

培养条件优化方面，时群和韦大器研究了不同培养条件对光叶楮试管苗玻璃化的影响，为提高试管苗质量提供了参考。江苏省林业科学研究院承担的省农业三项工程“光叶楮引种快繁及栽培示范推广”项目，形成了一套完整的组培快繁技术工艺流程，组培快繁周期为20天，增殖系数达4.5，培养过程中不发生褐变，试管芽苗玻璃苗率在3%以下，采用试管苗无根移栽技术，移栽成活率达87%。

1.3研究目标与内容

本研究旨在建立高效的光叶楮组织培养再生体系，为光叶楮的大规模繁殖和产业化发展提供技术支撑。具体研究内容如下：

外植体消毒：探索适合光叶楮外植体的消毒方法和消毒剂浓度，在有效杀灭外植体表面微生物的同时，最大程度减少对其组织细胞的损伤，提高外植体的存活率和无菌率。

诱导培养：研究不同植物激素种类及浓度组合对光叶楮外植体诱导愈伤组织和不定芽的影响，筛选出最佳的诱导培养基配方，提高诱导率和诱导质量。

增殖培养：优化光叶楮丛生芽的增殖培养条件，包括培养基成分、激素比例、培养环境等，增加增殖系数，获得大量健壮的丛生芽，为后续生根培养提供充足材料